病毒是一类由核酸分子和蛋白构成的非细胞形态的微生物,只能寄生在有细胞结构的生命体中才能存活。病毒入侵机体后,完全依赖于宿主细胞的能量和代谢系统进行自我复制,不断进化,严重影响到人类的生命健康,因此抗病毒药物的研发尤为重要。近年来,肿瘤、免疫和病毒感染途径等信号通路之间的交叉互作（Cross-talk）屡见报道,证明了生物体内这些信号途径之间可能存在着相互调控。Notch,Hedgehog以及Wnt信号通路在控制干细胞自我更新、在胚胎发育和分化中发挥着重要的作用。癌症干细胞的畸变可能与这三种信号通路异常活化相关。已有研究表明在病毒感染期间这三种信号通路也会发生变化。我们针对85种Notch,Hedgehog以及Wnt信号通路抑制剂进行了抗病毒活性的筛选。我们分别用表达GFP报告基因的水泡性口炎病毒（VSV-GFP）及表达萤光素酶Luc报告基因的登革病毒复制子（DENV-Luc）,筛选出了一系列具有抗病毒作用的信号通路抑制剂。其中,Hedgehog通路抑制剂HhAntag表现出广谱的抗病毒作用,可以显著抑制VSV,DENV以及寨卡（ZIKV）等病毒的复制。敲低HhAntag的效应蛋白GLI1同样具有抑制病毒感染的作用,而过表达GLI1则促进了病毒的感染水平。HhAntag对病毒的吸附、侵入以及早期转录都没有影响,但却抑制了病毒蛋白的翻译过程,其抑制靶点GLI1的效应亦是如此。我们还利用免疫沉淀结合质谱分析方法（IP-MS）,发现GLI1与eIF3复合物中的多个亚基具有相互作用。此外,我们还通过RNA-seq检测HhAntag对基因表达的影响,发现鞘氨醇-1-磷酸（S1P）信号通路中受体S1PR1和S1PR5含量明显减少。同样发现GLI1的表达受抑制后,这两个基因的表达也受到抑制;而过表达GLI1可以增强它们的表达。S1PR1和SIPR5的启动子区域存在GLI1潜在的结合位点,我们通过双荧光素酶报告系统实验发现GLI1对S1PR1和S1PR5启动子活性具有调控作用。同样,当加入S1P信号通路受体抑制剂后,GLI1对病毒的调控作用明显受到抑制。本课题首次揭示了 Hedgehog通路抑制剂HhAntag具有抗病毒作用,其作用机制主要是通过其效应蛋白GLI1来实现的。当GLI1的表达受抑制后,S1PR1和S1PR5的表达以及病毒蛋白的翻译水平均受到抑制。因此,HhAntag具有潜在的抗病毒应用价值,并为抗病毒药物的研发提供了新的靶点和方向。