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目的研究Runx2和Ⅵ型胶原在胸椎黄韧带骨化组织及正常黄韧带组织中的表达情况,并探讨两者在胸椎黄韧带骨化进程中的关系及各自的临床意义。方法将采集病例分为两组,其中TOLF组(骨化黄韧带组织取自TOLF患者)20例(男6例/女14例),年龄42-65岁,平均53岁；正常对照组(正常黄韧带组织取自外伤致胸段或胸腰段椎体骨折及胸椎间盘突出患者)8例(男5例/女3例),年龄18-65岁,平均47岁。采用HE染色方法对TOLF组患者与正常人的胸椎黄韧带中弹力纤维、胶原纤维形态变化进行观察,并对资料结果进行统计分析；用免疫组织化学及免疫荧光方法对TOLF组患者与正常人胸椎黄韧带中Runx2及Ⅵ型胶原的表达情况进行观察并对资料结果进行统计分析。结果1、HE染色在正常组中可见弹力纤维直径大致相等,排列紧密而规则,其间有少量的胶原纤维和散在的成纤维细胞。在TOLF组中可见弹性纤维排列紊乱、数量减少,胶原纤维增加,可见成软骨细胞和软骨细胞。正常组和TOLF组的成纤维细胞计数两组比较有显著性差异(t=9.399,P<0.05)。2、免疫组化可见TOLF组中Runx2在软骨细胞及成纤维细胞胞浆或胞核中均有较高表达,结果显示Runx2在20例黄韧带组织中的阳性表达率为100%,其中低表达(+)为5%(1/20),中等表达(++)为35%(7/20),强表达(+++)为60%(12/20)；在正常组中的阳性表达率为75%,其中无表达为25%(2/8),低表达(+)为75%(6/8),无中等表达(++)及强表达(+++)；Runx2在骨化组织中的表达水平明显高于正常对照组织,表达阳性率两组比较差异有统计学意义(X2=23.80,P<0.001)。Ⅵ型胶原阳性信号主要定位于成纤维细胞及软骨细胞的胞浆、胞膜及韧带基质中,结果显示Ⅵ型胶原蛋白在20例黄韧带组织中的阳性表达率95%,其中无表达为5%(1/20),低表达(+)为5%(1/20),中等表达(++)为25%(5/20),强表达(+++)为65%(13/20)；在8例正常黄韧带组织中的阳性表达率为87.5%,其中无表达为12.5%(1/8),低表达(+)为75%(6/8),中等表达(++)12.5%(1/8),无高表达；Ⅵ型胶原蛋白在骨化组织中的表达水平明显高于正常对照组织(X2=17.27,P<0.001)。3、免疫荧光检测结果：Runx2定位于软骨细胞及成纤维细胞胞浆或胞核中,其表达在正常对照组(19.89±1.01)与TOLF组(58.73±1.36)相比,组间比较存在显著性差异(t=72.81,P<0.001),表达明显低于骨化组；Ⅵ型胶原定位于成纤维细胞及软骨细胞的胞浆、胞膜及韧带基质中,其表达TOLF组(64.74±0.89)与正常组(22.77±1.12)相比,组间比较存在显著性差异(t=104.79,P<0.001),表达明显高于正常对照组。结论1、TOLF黄韧带中弹力纤维结构紊乱、数量减少,胶原纤维增加是导致黄韧带骨化的主要原因；证实Ⅵ型胶原蛋白在胸椎骨化韧带中呈现高表达。2、TOLF黄韧带在蛋白水平Ⅵ型胶原蛋白及Runx2高表达可能是TOLF发生、发展的重要因素；内源性Runx2可能参与黄韧带骨化的启动和持续保持骨化活性。3、Ⅵ型胶原蛋白与Runx2在黄韧带的骨化过程中既可能独立起作用,又可能协同起作用,共同促进黄韧带组织骨化。