脂肪干细胞对光老化性色素沉着模型的作用及其机制的探索

来源 :河北工程大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ljj3061105011
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目的:通过将脂肪干细胞(Adipose Derived Stem Cells,ADSCs)注射于光老化性色素沉着模型,进行皮肤宏观学评价、黑色素颗粒评价、HE染色和Elisa试剂盒检测。探究脂肪干细胞对光老化性色素沉着的作用及相关机制。方法:将15只豚鼠随机分为空白对照组(5只)和光老化模型组(10只)。空白对照组豚鼠不进行人为干预。光老化模型组豚鼠应用UVB照射法建立光老化模型后,每只豚鼠背部区域进行分区:ADSCs区(模型背部左侧+皮内注射ADSCs混合平衡盐溶液)、平衡盐区(模型背部右侧+皮内注射平衡盐溶液)。所有豚鼠隔日剃毛。空白对照组、光老化模型组分别在注射即刻、注射后2周和注射后4周进行皮肤宏观学评价、黑色素颗粒评价、HE染色和Elisa试剂盒检测。结果:(1)皮肤宏观学评价:光老化模型建立成功后可见豚鼠背部皮肤明显的皱纹、大量的红斑以及颜色逐渐加深。空白对照组豚鼠背部皮肤光滑、红润,偶见红斑、色素沉着及微小皱纹。空白对照组和平衡盐区得分在注射即刻、注射后2周、注射后4周的差异无统计学意义(即刻vs.2周P>0.05,2周vs.4周P>0.05,空白对照组F=0.105,平衡盐区F=1.056)。ADSCs区在注射后2周和4周皮肤宏观学得分逐渐降低,差异有统计学意义(即刻vs.2周P<0.05,2周vs.4周P<0.05,F=72.646)。(2)Masson-Fontana法染色:光老化模型建立成功后可见豚鼠表皮基底细胞层大量黑色素颗粒存在,黑色素颗粒粗大、部分聚集成团,呈线性连续分布,角质细胞可见黑色素颗粒形成“帽状结构”。空白对照组组织切片可见豚鼠表皮基底细胞层散在、少量黑色素颗粒存在,分布不均匀。空白对照组和平衡盐区在注射即刻、注射后2周、注射后4周基底层黑色素的含量差异无统计学意义(即刻vs.2周P>0.05,2周vs.4周P>0.05,空白对照组F=0.773,平衡盐区F=1.920)。ADSCs区在注射后2周和4周的基底层黑色素的含量逐渐减少,差异有统计学意义(即刻vs.2周P<0.05,2周vs.4周P<0.05,F=136.748)。(3)HE染色:光老化模型组建立成功后表现为表皮层变厚、真皮层变薄,结构不完整,层次不清晰,胶原纤维分布不均匀,伴大量炎性细胞浸润。空白对照组皮肤的厚度正常,细胞分层清晰,胶原纤维分布均匀。ADSCs区在注射后2周和4周的表皮逐渐变薄、真皮逐渐变厚,胶原纤维分布逐渐均匀,炎症细胞浸润变少。平衡盐区在注射后2周和4周较注射即刻无明显改变。(4)Elisa检测:空白对照组和平衡盐区在注射后三个时间段MMP1、MC1R和α-MSH的含量无明显变化(即刻vs.2周P>0.05,2周vs.4周P>0.05,空白对照组MMP1:F=0.185,MC1R:F=0.035,α-MSH:F=0.260,平衡盐区MMP1:F=3.071,MC1R:F=0.325,α-MSH:F=0.633)。ADSCs区在注射后三个时间段MMP1、MC1R和α-MSH的含量逐渐降低(即刻vs.2周P<0.05,2周vs.4周P<0.05,MMP1:F=58.557,MC1R:F=21.021,α-MSH:F=13.208)。结论:(1)UVB照射会导致豚鼠皮肤出现光老化及色素沉着。(2)脂肪干细胞具有治疗光老化作用。(3)脂肪干细胞具有改善色素沉着作用。(4)脂肪干细胞治疗光老化的机制可能是通过下调光老化形成的关键因子MMP1的表达,减少胶原蛋白的降解。(5)脂肪干细胞改善色素沉着的机制可能是通过下调黑色素合成的关键因子MC1R和α-MSH,干扰c AMP途径,从而减少黑色素的合成。
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