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目的：免疫性血小板减少症(Idiopathic thrombocytopenic purpura,ITP)是一种常见的获得性自身免疫性疾病。目前关于ITP发病机制的研究很多，包括自身抗体介导的血小板减少及巨核细胞的异常，细胞介导的细胞毒作用，B淋巴细胞激活因子(BAFF)过度表达，协同刺激分子的作用等，也有研究表明氧化应激与ITP的发病相关，随着分子生物学、免疫学、细胞遗传学等的发展，在基因层面上研究ITP的发病机制已然具有重要的意义。在自身免疫性疾病中，活性氧和活性氮作用产生的抗原决定簇可能会导致抗原表位的播散。氧化应激产生的自由基超出机体清除能力时会对体内的蛋白、脂质、DNA等进行修饰，从而导致了自身抗体的产生，或者直接对机体组织细胞产生损害，而导致了疾病的发生。在表皮细胞，氧化应激相关基因(Vanin-1基因)已被证实是一种氧化应激感受器，它能调整内源性谷胱甘肽的水平，影响氧化还原状态，从而导致疾病的发生。已有实验研究表明，儿童慢性ITP患者体内Vanin-1基因表达增高，同时血浆中还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽的比值(GSH/GSSG)降低，从而推测Vanin-1基因的表达增高在区分儿童急慢性ITP的发病中起到一定作用。本实验通过检测Vanin-1基因在成人ITP中的表达情况及测定ITP患者血浆中还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽的比值(GSH/GSSG)，来探讨Vanin-1的表达与ITP发病的关系。方法：1本实验收集了2012.4-2013.1部分在河北医科大学第二医院血液内科住院的ITP病人的血液标本，将其分为初治组54例、复发组19例、正常对照组30例，其中初治组按治疗前后(治疗后患者达完全反应)又分为治疗前组(54例)和治疗后组(49例)，复发组也按治疗前后(治疗后患者血小板再次升至正常达CR)分为复发治疗前组(19例)和复发治疗后组(19例)，在49例治疗后达CR的病人中按照治疗方法的不同，将其分为联合治疗组(静注人免疫球蛋白(0.4g/kg/d)加标量糖皮质激素(强的松1mg/kg/d))22例和激素治疗组(强的松5mg/kg/d)27例。2每例取2.5ml外周血，使用淋巴细胞分离液提取单个核细胞。3应用实时免疫荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time fluorescencequantitative pcr)的技术检测各组Vanin-1基因的表达水平。4并收集以上标本的血浆应用谷胱甘肽试剂盒通过分光光度法进行还原型谷胱甘肽与氧化型谷胱甘肽的比值(GSH/GSSG)的测定。5试验数据采用SPSS13.0统计软件进行处理，应用两个独立样本t检验或两个独立样本秩和检验来进行两两比较或做参数检验，将α=0.05作为显著性检验水准。结果：1Vanin-1基因在初治组、复发组及正常对照组的相对表达情况在54例初治组ITP患者中，Vanin-1基因的相对表达水平为4.864±1.471，正常对照组Vanin-1基因的相对表达水平为1.016±0.170，与正常对照组相比初治组Vanin-1基因表达升高，差别具有统计学意义(P=0.000＜0.05)；19例复发组ITP患者的Vanin-1基因的相对表达水平为4.261±1.021，与正常对照组相比Vanin-1基因表达升高，差别具有统计学意义(P=0.000＜0.05)；治初组与复发组相比差别无统计学意义(P=0.228＞0.05)。2GSH/GSSG在初治组、复发组及正常对照组中的情况在54例初治组ITP患者中，GSH/GSSG的比值为1.579±0.369，正常对照组GSH/GSSG的比值为9.989±1.065，两者相比差别具有统计学意义(P=0.000＜0.05)；19例复发组ITP患者的GSH/GSSG的比值为1.723±0.565，与正常对照组相比差别有统计学意义(P=0.000＜0.05)；初治组与复发组相比差别无统计学意义(P=0.446＞0.05)。3Vanin-1基因在初治组、复发组治疗前及治疗达CR后与正常对照组的表达变化情况在54例初治ITP患者中，治疗前Vanin-1基因的相对表达水平为4.864±1.471，49例治疗达CR后Vanin-1基因的相对表达水平为1.154±0.219，治疗前后相比差别有统计学意义(P=0.000＜0.05)，治疗后与正常对照组相比差别无统计学意义(P=0.132＞0.05)；在19例复发ITP患者中，治疗前Vanin-1基因的相对表达水平为4.261±1.021，19例治疗达CR后Vanin-1基因的相对表达水平为1.243±0.475，治疗前后相比差别有统计学意义(P=0.000＜0.05)，治疗后与正常对照组相比差别无统计学意义(P=0.147＞0.05)。4GSH/GSSG在初治组、复发组治疗前及治疗达CR后与正常对照组的变化情况在54例初治ITP患者中GSH/GSSG的比值为1.579±0.369，49例治疗达CR后GSH/GSSG的比值为9.754±1.219，治疗前与治疗后相比是降低的，差别具有统计学意义(P=0.000＜0.05)，治疗后与正常对照组相比差别无统计学意义(P=0.246＞0.05)；在19例复发ITP患者中GSH/GSSG的比值为1.723±0.565，治疗达CR后GSH/GSSG的比值为10.143±1.435，治疗前与治疗后相比是降低的，差别有统计学意义(P=0.000＜0.05)，治疗后与正常对照组相比差别无统计学意义(P=0.213＞0.05)。5不同方法治疗后Vanin-1基因的相对表达水平的差异在初治治疗达CR后的49例患者中，我们按照不同的治疗方法将其分为联合治疗组(静注人免疫球蛋白(0.4g/kg/d)加标量糖皮质激素(强的松1mg/kg/d))22例和激素治疗组(强的松5mg/kg/d)27例，结果显示联合治疗组Vanin-1基因的相对表达水平为1.145±0.195，激素治疗组Vanin-1基因的相对表达水平为1.257±0.397，应用不同方法治疗后患者Vanin-1基因的表达水平差别无统计学意义(P=0.291>0.05)。6初治ITP患者按性别、年龄分别分组，Vanin-1在各组中的表达情况初治ITP患者中女性38例，Vanin-1基因的相对表达水平为4.753±1.286，男性16例Vanin-1基因的相对表达水平为4.834±1.249，两组相比Vanin-1基因相对表达水平无统计学意义(P=0.232＞0.05)，年龄≥60岁者14例，Vanin-1基因的相对表达水平为4.792±1.065，年龄＜60岁者40例，Vanin-1基因的相对表达水平为4.861±1.219，两者比较Vanin-1基因相对表达水平无统计学意义(P=0.142＞0.05)。7初治ITP患者血小板计数与Vanin-1的表达情况对初治ITP患者外周血血小板计数与Vanin-1基因的表达水平进行相关性分析，结果显示两者之间无相关性(P＞0.05)。结论：1初治组及复发组ITP患者的Vanin-1基因的表达水平均高于正常对照组，并且在治疗有效后Vanin-1基因的表达水平又降低。提示Vanin-1基因可能参与了ITP的发病过程，为探讨ITP的发病机制提供了理论依据。2初治组及复发组ITP患者血浆中GSH/GSSG比值明显低于正常对照组，而在治疗有效后比值又升高，提示在ITP患者体内存在氧化应激状态，且经过治疗后可恢复。3不同治疗方法的ITP患者，Vanin-1基因的表达水平无统计学差异。这提示不能用Vanin-1基因的表达量来判断不同方法治疗ITP的疗效。4本研究显示初治ITP患者Vanin-1基因的表达水平与性别、年龄无关，并且与治疗前血小板计数无相关性。