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三十多年来,人工关节置换术是治疗终末期关节病损有效、可靠、经济的方法,随着人工关节设计和加工、固定等方面的进步,机体对磨损颗粒的异常生物反应已成为限制人工关节置换术寿命的主要因素。既往研究多集中于磨损颗粒激活假体周单核巨核细胞和骨吸引增强上,而对假体周骨髓间质干细胞对磨损颗粒的反应以及骨形成和骨吸收研究很少。事实上人工关节置换术后假体周净骨量的维持有赖于骨形成与骨吸收间良好的平衡,因此为了进一步认识晚期人工关节假体发生无菌性松动的机理,非常有必要从骨髓间质干细胞增殖及成骨分化研究磨损颗粒—亚微型钛合金颗粒(Submicron Titanium particles)及微型钛合金颗粒对成年大鼠骨髓间质干细胞增殖活性和成骨分化的影响。为探讨人工关节无菌性松动等疾病的病理机制及治疗提供新思路。 我们采用密度梯度离心及PERCOLL分离和传代筛选贴壁细胞的方法分离培养的大鼠骨髓间质干细胞(rMSCs),实验证明可以获得较纯化的大鼠骨髓间质干细胞。电镜观察表明该细胞具有生长旺盛的成纤维细胞的一般特征,细胞流式仪测得细胞表面分子铁颗粒负荷对骨髓间质干细胞增殖及成骨分化的影响一论文摘要CD44呈阳性,C D45呈阴性。结合体外培养大鼠骨髓间质干细胞的强增殖能力和诱导分化为成骨细胞和脂肪细胞的特性,证实了我室培养的大鼠骨髓间质干细胞具有干细胞特性。 采用共聚焦激光扫描显微镜及四哇盐比色法测定钦颗粒负荷前后的成骨诱导的骨髓间质干细胞增殖能力;实验证明在钦颗粒负荷下随颗粒的大小时、浓度、及钦颗粒负荷时间的不同、其增殖能力均表现出不同程度的下降。 使用成骨诱导剂作用于传代培养的大鼠骨髓间质干细胞,用细胞化学和免疫细胞化学测定钦颗粒负荷前后骨髓间质干细胞成骨诱导后的碱性磷酸酶、骨钙素、I型胶原含量的变化。实验证明骨髓间质干细胞具有在诱导条件下分化为成骨细胞的能力,表现为碱性磷酸酶活性的增加、工型胶原和骨钙素血清含量的升高和钙化沉积的形成。在钦颗粒负荷下,随颗粒的大小时、浓度、及钦颗粒负荷时间的不同、其碱性磷酸酶活性的下降、工型胶原和骨钙素血清含量的降低和钙化沉积减少。 研究表明,钦颗粒负荷后影响骨髓间质干细胞增殖及成骨分化,可能是晚期人工关节置换术后假体周净骨量的减少及无菌性松动的原因之一。 关键词:大鼠骨髓间质干细胞钦颗粒人工关节置换术无菌性松动