本文分别以美沙拉嗪及其代谢产物、紫杉醇、罗库溴铵为模型药物，采用96孔板高通量蛋白沉淀、液液萃取、固相萃取方法作为生物样品前处理方法，研究建立了96孔板样品批处理的高效能体内药物分析方法，并将其应用到药物动力学研究中。　　本文选用美沙拉嗪及其代谢产物乙酰美沙拉嗪作为待测目标药物，以96孔板形式的蛋白沉淀为生物样品前处理方法，研究建立了以LC-MS/MS为基础的体内分析方法。该方法色谱柱选用Diamonsil C18（5μm，100×4.6mm）柱，以甲醇-5mmol/L醋酸铵水溶液（体积比85∶15）作为流动相，流动相流速为0.4ml/min，质谱选用MRM模式，分别以151.7、193.8和107.9、149.7作为待测目标化合物美沙拉嗪和乙酰美沙拉嗪的检测一、二级离子，并考察、优化了雾化温度、雾化电压、检测电压等系列质谱参数，在该条件下美沙拉嗪、乙酰美沙拉嗪和内标的保留时间分别为2.2min、2.2min、3.7min，色谱峰无拖尾和前延，分离度良好。该分析方法通过系统的方法学验证，结果显示：专属性和线性良好，线性范围为0.20032-200.32μg/ml（美沙拉嗪）、0.02012-2.012μg/ml（乙酰美沙拉嗪），精密度、相对回收率、绝对回收率、基质效应、稀释效应、稳定性均符合要求。将2批美沙拉嗪高剂量肠溶缓释颗粒剂及2种参比制剂（美沙拉嗪肠溶片和美沙拉嗪缓释颗粒）以4×4拉丁方设计方法单剂量口服给药16条Beagle犬，通过测定不同时间点血药浓度数据，计算待测药物药动学参数，进行药物动力学评价。　　本文选用紫杉醇作为待测目标药物，以96孔板形式的液液萃取为生物样品前处理方法，研究建立了以LC-MS/MS为基础的体内分析方法。该方法色谱柱选用Ultimate C8（5μm，50×4.6mm）柱，以0.1%甲酸-甲醇（体积比10∶90）作为流动相，流动相流速为0.3mL/min，质谱选用MRM模式，分别以876和308作为待测目标化合物紫杉醇的检测一、二级离子，并考察、优化了雾化温度、雾化电压、检测电压等系列质谱参数，在该条件下紫杉醇和内标的保留时间分别为3min、3min，色谱峰无拖尾和前延，分离度良好。该分析方法通过系统的方法学验证，结果显示：专属性和线性良好，线性范围为2.02-505ng/mL，精密度、相对回收率、绝对回收率、基质效应、稀释效应、稳定性均符合要求。将紫杉醇乳剂与注射剂单剂量注射给药6条Beagle犬，通过测定不同时间点血药浓度数据，计算待测药物药动学参数，进行药物动力学评价。　　本文选用罗库溴铵作为待测目标药物，以96孔板形式的固相萃取为生物样品前处理方法，研究建立了以LC-MS/MS为基础的体内分析方法。该方法色谱柱选用Waters Symmetry C18（4.6×150mm，3.5μm）柱，以甲醇-5mmol/L醋酸铵（体积比90∶10）作为流动相，流动相流速为0.8ml/min，质谱选用MRM模式，分别以529.4和487.3作为待测目标化合物罗库溴铵的检测一、二级离子，并考察、优化了雾化温度、雾化电压、检测电压等系列质谱参数，在该条件下紫杉醇和内标的保留时间分别为3.3min、3.5min，色谱峰无拖尾和前延，分离度良好。该分析方法通过系统的方法学验证，结果显示：专属性和线性良好，线性范围为10.08-5040ng/mL，精密度、相对回收率、绝对回收率、基质效应、稀释效应、稳定性均符合要求。将罗库溴铵与奥美克松钠单剂量序贯注射给药6条Beagle犬，通过测定不同时间点罗库溴铵血药浓度数据，计算罗库溴铵药动学参数，进行药物动力学评价。　　结果表明，较之采用传统的体内药物分析方法，该方法在操作步骤、样品通量和检测灵敏度上均得到了明显的改进和优化，简化了前处理过程、提高了前处理速度、增加了前处理通量、缩短了色谱分析时间，并将该法成功的应用到了药代动力学和生物等效性研究中。