【摘 要】
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目的:大部分人类肿瘤中都存在着p53蛋白的积累.用细胞内完整表达的蛋白代替合成多肽,可以不受HLA类型的限制,扩大了临床应用.本研究的重点在如何使成熟的DC获得p53的高表达,
【出 处】
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中国协和医科大学 北京协和医学院 中国医学科学院 清华大学医学部
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目的:大部分人类肿瘤中都存在着p53蛋白的积累.用细胞内完整表达的蛋白代替合成多肽,可以不受HLA类型的限制,扩大了临床应用.本研究的重点在如何使成熟的DC获得p53的高表达,也将观察p53蛋白是否能在DC内积累而不引起细胞的凋亡.结论:1、来自肿瘤患者外周血的DC前体细胞采用AIM V培养液,在各种因子的联合作用下,能够稳定获得分化良好且具有典型表型的DC.2、构建了含有249密码子突变型p53基因的逆转录病毒重组体,并经PCR/RFLP方法、DNA测序鉴定证实.3、经脂质体介导将构建的重组p53表达载体转染未成熟的DC,在其成为具有典型表型的成熟DC时,获得了高水平的突变型p53蛋白表达.初步结果提示突变型p53蛋白在DC中表达并不引起细胞凋亡.4、初步研究显示用表达hTERT的逆转录病毒感染DC能获得表达,但早期阳性率仅9%.感染后的DC在培养中显示出数量增加,hTERT阳性率也增加到56%以上,提示hTERT有可能增加DC的分裂能力.
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