参附注射液对实验性慢性心力衰竭大鼠心脏保护作用的研究

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目的:通过研究参附注射液对实验性心力衰竭大鼠血流动力学、心脏病理结构、左室组织中内皮素(ET)、血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)含量的影响,探讨参附注射液对实验性慢性心力衰竭大鼠心脏的保护作用及作用机理。 方法: 1.造模方法:采用腹主动脉缩窄法制做心衰大鼠模型。取Wistar大鼠115只用3%戊巴比妥钠(按0.1ml/100g ip)麻醉,将动物固定于手术台上,腹部正中切口2cm后钝性分离腹主动脉,在肾动脉分枝上用7号缝合线将腹主动脉与7号针头一起结扎,然后抽出探针形成腹主动脉狭窄(约50%),同时腹腔一次性注射青霉素10万单位关腹缝合。造模时间四周。四周后大鼠死亡40只剩余75只。死亡率约34.7%。随机取正常大鼠15只、造模大鼠15只,记录其一般情况并通过右颈总动脉插管入左室,BL-410生物实验系统记录左室内压峰值(LVSP)、左室压力上升最大速度(+dp/dtmax)、左室舒张末压(LVDEP)及左室压力下降最大速度(-dp/dtmax),用成对资料的t检验作统计学处理,同时做大鼠心肌病理切片,根据P值、一般情况及病理切片确定造模成功。 2 实验分组及给药方法:正常组取正常大鼠15只,模型空白组取已造模成功大鼠15只,参附高剂量组取已造模成功大鼠15只、参附低剂量组取已造模成功大鼠15只、依那普利组取已造模成功大鼠15只。正常组和模型空白组大鼠不作任何处理,参附高剂量组腹腔注射参附0.8ml/100g,参附低剂量组腹腔注射参附0.4ml/100g,依那普利组依那普利灌胃0.045mg/100g,连续四周。 3.观察指标:(1)一般情况。(2)血流动力学。(3)左室病理切片。(4)实验室检测:包括内皮素(ET)、血管紧张素-Ⅱ(Ang-Ⅱ)、肿瘤坏死因子-a(TNF-a)、白细胞介素-6(IL-6)。 4.统计分析:检测值使用SPSS12.0统计软件包进行方差分析和成对资料的t检验,检测值用均数±标准差(x±S)表示。 结果 1.一般情况 大鼠造模二周左右开始出现大量掉毛、饮食活动减少、怕冷、心率加快,部分大鼠出现口鼻部有红色溢出液,三周后上述症状加重,大部分大鼠出现呼吸困难,可闻及喉中哮鸣音。 2.血流动力学检测结果 2.1 造模大鼠的血流动力学检测结果:腹主动脉缩窄四周后,大鼠LVSP、+dp/dtMAX、-dp/dtMAX与正常组比较下降,HR、LVEDP与正常组比较上升,其结果有显著性差异(P<0.01)。 2.2 给药后的血流动力学的检测结果:正常组HR显著低于模型空白组(P<0.01),与其他三组比较无显著性差异(P>0.05),模型空白组HR较其他四组显著性升高(P<0.01),参附高剂量组较参附低剂量组、依那普利组显著降低(P<0.01),参附低剂量组较依那普利组显著降低(P<0.01)。正常组LVSP显著高于其他四组(P<0.01),模型空白组LVSP较参附高剂量组、依那普利组显著降低(P<0.01),与参附低剂量组比较无显著性差异(P>0.05),参附高剂量组LVSP较参附低剂量组显著升高(P<0.01),与依那普利组比较无显著性差异(P>0.05)。正常组LVEDP显著低于其他四组(P<0.01),模型空白组LVEDP较参附高剂量组、参附低剂量湖北中医学院硕士学位论文组、依那普利组显著升高(P<0 .01),参附高剂量组较参附低剂量组显著降低 (P<0.01),与依那普利组比较无差别(P>0 .05),参附低剂量组较依那普利组有显著性升高(P(0.01)。正常组+dp/dt,,:、、一dp/dtmax显著高于其他四组(P(0.01),模型空白组较其他四组显著降低(P<0.01),参附高剂量组+dp/dt,:与依那普利组无显著性差异(P>0.05),而较参附低剂量组有显著性升高(P<0.01),参附低剂量组+dp/dt,:显著低于依那普利组(P(O.0l);参附剂量高组一dp/dt。:显著高于参附低剂量组、依那普利组(P<0 .01),参附低剂量组一dP/dt。,与依那普利组无显著性差异(P>0.05)。3.病理切片结果3.1造模大鼠与正常大鼠左室病理切片比较结果:光镜下正常大鼠左室病理切片心肌细胞大小正常,边缘清楚,胞浆均匀;心肌细胞排列整齐,无心肌纤维断裂,无细胞间质水肿(如图1);造模大鼠左心室心肌细胞明显肥大、增宽,胞核浓染、增大,心肌细胞排列紊乱,心肌纤维断裂,心肌间质水肿(如图2),二者之间有显著性差别。3.2给药后大鼠左室病理切片检测结果:光镜下参附高剂量组、参附低剂量组及依那普利组心肌细胞轻度增大,边缘清楚,胞浆均匀;心肌细胞排列整齐,无心肌纤维断裂,无细胞间质水肿,三者之间无显著性差异(如图3,如图4,如图5),与模型空白组有显著性差异。4.心肌组织中IL一6、TNF一a、ET、Ang一H含量的检测结果 (1)IL一6:正常组与参附高剂量组比较无显著性差异(P>0.05),参附高剂量组与参附低剂量组、‘依那普利组比较IL一6含量显著降低(P<0.01),参附低剂量组与依那普利组比较工L一6含量无显著性差异(P>0 .05),说明参附注射液对慢性心力衰竭大鼠心肌组织IL一6有显著抑制作用,其抑制作用优于依那普利,有量效关系。 (2) TNF一a:正常组TNF一a含量与参附高剂量组、依那普利组无显著性差异 (P>0.05),较模型空白组、参附低剂量组有显著性降低(P(0 .01),模型空白组TNF一a含量较其他四组有显著性升高(P<0.01),参附高剂量组较参附低剂量组TNF一a含量有显著性降低(P<0 .01),与依那普利组?
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