通过对嗜酸乳杆菌增菌培养的各种研究文献、报告等的分析,以及国内外嗜酸乳杆菌益生制品的审视,认识到嗜酸乳杆菌益生菌制品活菌数的研究一直都是一个难题,需要迫切的解决,对人类健康益生保健有着重大的影响。综合国内外嗜酸乳杆菌制品的研究、生产现状,本研究在嗜酸乳杆菌培养基、发酵培养工艺以及冷冻干燥工艺等多方面着手,以求提高嗜酸乳杆菌益生制品活菌数,满足国内外生产以及人类生活保健的需要。本研究包括嗜酸乳杆菌基本生理活性测定、培养基配方的研究、发酵罐发酵条件的摸索、离心收集活菌条件的研究、冷冻干燥保护配方工艺的研究等五部分的研究。第一部分通过模拟人体胃肠道环境,对嗜酸乳杆菌耐酸耐胆盐、抑制有害菌、抵抗抗生素等各种生理生化能力活性指标,进行了深入的研究。结果表明,嗜酸乳杆菌菌株具有很强的耐酸耐胆盐能力,很强的抑制有害菌的能力,很强的抵抗抗生素的能力,能够以较高的活性顺利通过胃肠环境定殖于肠道发挥益生作用。第二部分在常规培养基的基础上,优化培养基碳源、氮源、益生因子等各种营养因素的添加,研究得到最佳培养基配方:葡萄糖2%,低聚异麦芽糖0.5%,乳糖0.1%,蛋白胨0.6%,胰蛋白胨0.45%,大豆蛋白胨0.45%,L-半胱氨酸盐酸0.15%,牛肉膏1.0%,酵母提取物0.5%,吐温-80 0.1%,硫酸锰0.25g,乙酸钠5.0g,柠檬酸氢二氨2.0g,硫酸镁0.58g,K₂HPO4_·3H₂O 2.0g,添加蒸馏水后总量为1000mL,121℃高压蒸汽灭菌15min。培养嗜酸乳杆菌可达菌数2.90×10⁹cfu/mL,是MRS培养时的2倍之多,使嗜酸乳杆菌的增殖多了一倍。第三部分模拟工业发酵,在实验室瑞士比欧3.7L发酵罐中,摸索出最佳发酵培养条件,恒温37℃、恒pH 5.85、恒定转速100r/min,调碱中和剂为20%NH₃·H₂O,以2%接种量接入活化嗜酸乳杆菌KLDS1.8701进行培养,从8h¹0h,以2.5g/L*h流加速度补充葡萄糖,10h¹2h,以1g/L*h的速度补料,12h收获菌体。最终,菌数从MRS培养时的1.21×10⁹cfu/mL,提高到7.01×10⁹cfu/mL,提高约6⁷倍。第四部分研究摸索离心工艺,得到最佳的离心方案,在4℃冷冻离心机中,设置离心力6000g,离心20min收集菌体,嗜酸乳杆菌离心收得率为82.71%,离心存活率为82.73%。第五部分对嗜酸乳杆菌冷冻干燥保护深入研究,得到最佳冷冻干燥保护剂组合:4%PVP K-30、20%脱脂乳、6%海藻糖、0.5%谷氨酸钠和4%甘油,可使嗜酸乳杆菌冷冻干燥后存活率达到93.33%。制得的冷冻干燥活菌制品,益生菌含量为1.35×10¹⁰ cfu/g,含水量为2.15%。