随着环境污染问题的日益严重，土壤、空气以及水都受到了不同程度的影响，许多酿造企业都依赖于特定的微生物群落，环境的变化会直接改变微生物群落的结构，继而影响企业产品质量的稳定性。所以，定期的检测所依赖的微生物群落构成是十分必要的，而现在测定微生物群落构成的技术速度都很慢，快速定量检测技术亟需研究，本课题对这一技术进行初步的研究，主要采用实时荧光定量PCR的方法，通过影响样品的Tm值来对微生物群落进行区分，筛选出对微生物群落区分有明显效果的PCR增效剂和增效剂组合。本课题主要进行了三方面的研究，首先对古井中的酿酒微生物进行鉴定，主要是窖泥中的微生物，分析其中的主要种属和含量，与大曲中的微生物进行比较，选择出具有代表性的模板；其次使用13种单一增效剂和78种增效剂组合对模板进行QPCR扩增，看是否可以对选择出的主要种属进行明显的区分；最后使用模板模拟大曲中的微生物所占比例，通过QPCR方法和做导数图的方法进行分析，分析不同比例混合的模板能否通过此种方法检测到菌群的变化，并将PCR增效剂添加到其中，了解对定量识别效果有何影响。经过实验得到以下结论，古井窖泥中已知菌属较大曲中的微生物种类少且含量少，两者之间的微生物构成有很大不同；筛选出了对微生物群落有明显区分效果的9种单一PCR增效剂和12种增效剂组合，进一步筛选得到了单一增效剂甜菜碱和增效剂组合甜菜碱和乙二醇；使用QPCR方法和做导数图的方法可以检测到混合模板的比例发生变化。