研究背景与目的脑缺血再灌注损伤(Cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)对于接受血管内取栓术的急性颅内动脉闭塞患者是具有危害的。已有研究表明,渐增式脑血流重建(Gradual Flow Restoration,GFR)可以短期有效的减轻脑损伤,但其远期保护作用、具体的调控机制和过程目前尚不清楚。因此,延长模型大鼠术后检测时间,找到多个参与缺血再灌注损伤过程的相关转录因子将为GFR干预发挥远期神经保护提供分子调控机制线索,从而为CIRI的治疗提供潜在的治疗靶点。方法线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞模型,随机分为GFR组、骤增式脑血流重建(Rapid Flow Restoration,RFR)组、永久性闭塞(Permanent occlusion,P0)组,以假手术(Sham)组为对照组。四组根据再灌后不同时间进一步分为三个亚组:再灌注1、3和7天;采用神经缺损行为评分和TTC(2,3,5-三苯基氯化四唑)染色评价GFR等干预方式在不同时间的脑损伤程度;利用GEO数据库对GSE32529芯片数据集进行分析,初步筛选和鉴定脑缺血再灌注损伤关键差异表达基因。运用蛋白印迹法检测各MCAO模型组及对照组大鼠大脑皮层梗死部位基因芯片筛选蛋白的表达变化。结果GFR干预后MCAO大鼠神经功能缺损程度减轻、脑梗死体积缩小。与Sham组相比,MCAO大鼠神经功能明显发生缺损,脑梗死体积显著增加(P<0.001);GFR组大鼠神经功能缺损及脑梗死体积显著低于RFR组和P0组(P<0.001),而RFR组与P0组的神经功能缺损无显著差异(P>0.05),梗死体积存在差异(P<0.05)。基因芯片筛选发现神经元沉默因子(Repressor element-1 silencing transcription factor,REST)在缺血再灌注损伤后的大鼠脑组织中高表达,同时其调控的BRINP1、CALB1、GABRD、L1CAM等下游基因表达下调;Western blot结果显示:与Sham组相比,MCAO模型大鼠脑REST蛋白表达显著升高(P<0.05),而RFR组和GFR组大鼠脑组织REST蛋白的表达显著低于P0组(P<0.01);与RFR组比较,GFR组REST蛋白表达受到抑制(P<0.05)。GFR干预抑制了 MCAO大鼠的静息表达,减轻了 MCAO大鼠的脑损伤。且各项检测指标随再灌注时间延长而得到改善。结论GFR具有长期神经保护效应。REST在脑缺血再灌注损伤中表达增高,下调REST可减轻缺血再灌注脑损伤。GFR可能通过下调REST基因的表达,减轻脑损伤、神经功能缺损,而发挥神经保护作用。