【摘 要】
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目的:基于TGF-β1/Smad3信号通路探讨壮药拔毒生肌膏干预兔耳缺血性创面愈合的作用机制,为临床应用壮药拔毒生肌膏作用于缺血性创面提供有力的实验数据。方法:将新西兰白兔45只（共90只兔耳）,按随机数字表法随机分成空白组（9只）和造模组（36只）。造模组采用“贯穿缝扎+打孔法”在兔耳背侧建立一直径约2cm的缺血性圆形创面,空白组采用“打孔法”单纯构建一直径约2cm的非缺血性圆形创面,造模成功后
【基金项目】
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2013年国家自然科学基金项目《壮药拔毒生肌膏激活特异生长因子 EGF、VEGF 治疗慢性难愈创面的实验研究》（81360572）；
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目的:基于TGF-β1/Smad3信号通路探讨壮药拔毒生肌膏干预兔耳缺血性创面愈合的作用机制,为临床应用壮药拔毒生肌膏作用于缺血性创面提供有力的实验数据。方法:将新西兰白兔45只（共90只兔耳）,按随机数字表法随机分成空白组（9只）和造模组（36只）。造模组采用“贯穿缝扎+打孔法”在兔耳背侧建立一直径约2cm的缺血性圆形创面,空白组采用“打孔法”单纯构建一直径约2cm的非缺血性圆形创面,造模成功后将造模组按随机数字表法随机分为模型组、贝复济组、湿润烧伤膏组、拔毒生肌膏组（每组各9只）。造模成功后各组每日均进行换药干预,换药前均用碘伏清洁创面,模型组和空白组均外敷生理盐水纱条,贝复济组外敷贝复济纱条,湿润烧伤膏组外敷湿润烧伤膏纱条,拔毒生肌膏组外敷拔毒生肌膏纱条,各组最后均覆盖两层方纱,胶布固定,1天/次,连续换药21d。各组分别于干预后7d、14d、21d观察兔耳缺血性创面愈合的大体情况并计算创面愈合率,蛋白免疫印迹法（WB）检测兔耳创面组织TGF-β1、Smad3蛋白表达,荧光定量PCR技术检测TGF-β1、Smad3 mRNA表达,HE染色技术观察兔耳缺血性创面组织病理情况。结果:（1）创面愈合情况:随时间延长,各组创面愈合面积逐渐减小。干预后7d,拔毒生肌膏组、湿润烧伤膏组创面脓性渗出增多;干预后14d、21d,拔毒生肌膏组、湿润烧伤膏组创面脓性渗出明显减少,肉芽组织逐渐增多。（2）创面愈合率:相较于模型组,拔毒生肌膏组、湿润烧伤膏组、空白组7d、14d、21d创面愈合率升高（P＜0.05）;相较于空白组,拔毒生肌膏、湿润烧伤膏7d、21d创面愈合率无明显变化（P＞0.05）;相较于贝复济组,拔毒生肌膏能显著提高7d、14d、21d创面愈合率（P＜0.01）。相较于湿润烧伤膏组,拔毒生肌膏组7d、14d、21d创面愈合率无明显变化（P＞0.05）。（3）TGF-β1、Smad3蛋白表达水平:相较于模型组,空白组、湿润烧伤膏组7d、14d、21d及拔毒生肌膏组7d TGF-β1、Smad3蛋白表达均下降（P＜0.05）,贝复济组7d、14d、21d TGF-β1、Smad3蛋白表达无明显差异（P＞0.05）;相较于空白组,拔毒生肌膏组、湿润烧伤膏组21d TGF-β1、Smad3蛋白表达量无明显差异（P＞0.05）;相较于贝复济组,拔毒生肌膏、湿润烧伤膏14d TGF-β1、Smad3蛋白表达量无明显变化（P＞0.05）;相较于湿润烧伤膏组,拔毒生肌膏组7d、14d、21d TGF-β1、Smad3蛋白表达无明显差异（P＞0.05）。（4）TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平:相较于模型组,除贝复济组外,各组创面7d、14d、21d TGF-β1、Smad3 mRNA表达水平均降低（P＜0.05）;相较于空白组,拔毒生肌膏组和贝复济组14d、21d TGF-β1、Smad3 mRNA表达上升（P＞0.05）;相较于贝复济组,拔毒生肌膏组7d、14d、21d TGF-β1、Smad3 mRNA表达无差异（P＞0.05）;相较于湿润烧伤膏组,拔毒生肌生肌膏7d、14d、21d TGF-β1、Smad3 mRNA无明显变化（P＞0.05）。（5）创面组织病理情况:干预后7d,各组均有嗜中性粒细胞和淋巴细胞等炎性细胞浸润,拔毒生肌膏组、湿润烧伤膏组创面组织鳞状上皮再生速度较快,创面痂下可见增多的新生毛细血管和成纤维细胞;干预后14d,除模型组外,各组创面大半被再生鳞状上皮覆盖,肉芽组织生长、毛细血管扩张明显,成纤维细胞逐渐转为纤细的纤维细胞;干预后21d拔毒生肌膏组、湿润烧伤膏组表皮明显角化,成纤维细胞及胶原沉积较少。结论:（1）壮药拔毒生肌膏、湿润烧伤膏能够明显改善兔耳缺血性创面渗出,促进肉芽组织生长。（2）壮药拔毒生肌膏、湿润烧伤膏、贝复济均能加速兔耳缺血性创面愈合,提高创面愈合率,壮药拔毒生肌膏和湿润烧伤膏在提高创面愈合率方面无显著性差异。（3）壮药拔毒生肌膏、湿润烧伤膏可能通过激活TGF-β1/Smad3信号通路,下调兔耳缺血性创面组织中TGF-β1、Smad3蛋白及mRNA的表达来促进创面愈合。贝复济可能不参与TGF-β1/Smad3信号通路来调控创面组织中TGF-β1、Smad3蛋白及mRNA的表达。（4）壮药拔毒生肌膏、湿润烧伤膏均能增加兔耳缺血性创面组织毛细血管生成,抑制胶原沉积,减少瘢痕形成。
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