【摘 要】
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目的:探讨氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)介导的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞的毒性作用。方法:原代培养SD大鼠皮肤成纤维细胞。细胞分成不同的组给予药物处理之后,MTT法检测细胞活力;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;流式细胞仪分析细胞周期变化,AnnexinV联合PI法,及Hoechst-PI双染色法来检测细胞的凋亡和坏死。结果:与培养体系内不含甲胺的组相比:在1.0 mM甲胺和1.02×10-3
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目的:探讨氨基脲敏感型胺氧化酶(SSAO)介导的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞的毒性作用。方法:原代培养SD大鼠皮肤成纤维细胞。细胞分成不同的组给予药物处理之后,MTT法检测细胞活力;β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老;流式细胞仪分析细胞周期变化,AnnexinV联合PI法,及Hoechst-PI双染色法来检测细胞的凋亡和坏死。结果:与培养体系内不含甲胺的组相比:在1.0 mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用48 h后,细胞活力降为(16.3±2.9)%(P<0.05),而同时给予抑制剂氨基脲和肼屈嗪,细胞活力分别为(121.5±22.6)%﹑( 93.6±16.6)%;0.5mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用36 h后,细胞活力降为(54.0±6.6)%,而给予谷胱甘肽可使细胞活力恢复至(100.1±13.1)%。在0.2 mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用下传代3次之后,β-半乳糖苷酶阳性细胞显著增多,细胞周期没明显变化。1.0 mM甲胺和1.02×10-3 U/ml SSAO共同作用48 h后,细胞凋亡率和细胞增殖指数都显著提高(P<0.05),坏死程度较对照组加重。1.0mM甲胺和1.60×10-3 U/ml SSAO共同作用48 h后,细胞凋亡率和细胞增殖指数较对照组没明显变化,但坏死程度较酶活性为1.02×10-3 U/ml,甲胺浓度为1.0mM的处理组更为严重。结论:SSAO催化的甲胺氧化对大鼠皮肤成纤维细胞有明显毒性作用。谷胱甘肽可以缓解SSAO活性所带来的细胞的损伤。这种损伤与大鼠皮肤成纤维细胞的衰老,凋亡和坏死都有关系。
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