蓝藻是原核生物，遗传背景相对简单，是很理想的真核基因表达受体，其遗传转化研究进展很快。应用穿梭质粒载体和基因整合平台系统已经成功地在多种蓝藻中实现了外源基因的表达。螺旋藻是一类丝状蓝藻，含有大量的蛋白质及其它人体所必需的营养物质，是少数已被确证可以安全使用的蓝藻之一，更适用于作为生产有用蛋白质的生物反应器开发，并制造可直接食用的基因工程产品。但是，螺旋藻作为外源基因工程受体的研究由于缺乏行之有效的遗传转化途径而始终进展缓慢。 螺旋藻内高活性的胞内核酸酶是外源基因转化螺旋藻的主要障碍。我们以供体质粒pEUTISI为主要的酶消化底物，通过多种方法处理螺旋藻细胞，然后检测其胞内核酸酶初提液对pEUTISI的降解作用。结果表明，2mmol／L以上的EDTA处理16h或无Mg2+螺旋藻培养基培养72h以上，都可以使处于对数生长期的螺旋藻胞内酶活性显著降低。低于28℃培养也可稳定降低螺旋藻的胞内核酸酶活性。综合以上结论，我们用2mmol／L的EDTA处理24℃培养的螺旋藻16-20h，结合超声波转化供体质粒的方法，建立了稳定的螺旋藻遗传转化途径。 用整合型质粒载体pEUTISI和pEUTR超声波转化螺旋藻，获得了稳定的具有G418抗性的螺旋藻培养系SP-I和SP-R，但藻株在形态上发生了一定的变异。以外源基因的两侧引物对转化藻的染色体进行PCR扩增，得到与阳性对照相同的DNA片段。以Km’基因为探针，对SP-I和SP-R进行Southern-blot鉴定，结果表明，SP-I的G418抗性确实是由于染色体整合了供体质粒Kmr基因所表达的。对SP-I蛋白质的SDS-PAGE凝胶电泳分析发现与预期外源目的基因——融合蛋白Ub-Tα1大小相当的特异蛋白条带。Western-blot结果表明，该特异带能与抗Tα1的抗血清结合，证实目的基因Ub-Tα1基因在转基因螺旋藻SP-I中获得了表达。 此外，我们分别建立了具有潮霉素和氯霉素抗性的两个克隆载体pAH和pKR。用质粒pDR2的潮霉素抗性基因替代质粒pUTK的Kmr片段，得到具有潮霉素和氨卞青霉素抗性的质粒pAH，该质粒含有蓝藻藻蓝蛋白基因的两侧同源片段L和R；以pKF3为出发质粒，插入蓝藻藻蓝蛋白的同源序列R 片段，得到具有氯霉黝性的整缄体邮。这两个含有抗性（潮霉素和氯 霉素）标记基因载体的构建，为螺旋藻更好地进行筛选转化工作打下了基础