四季秋海棠（Begonia semperflorens）是秋海棠属植物,四季开花,抗逆性强,具有重要的商业价值和市场潜力。目前我国对四季秋海棠的研究主要集中在栽培生理方面,关于其遗传背景的探讨几乎没有。然而由于人工杂交选育等原因,四季秋海棠种间和种内基因渐渗频繁,厘清其遗传背景,对于当前环境下四季海棠优良品种的选育具有重要意义。荧光原位杂交技术（Fluorescence in situ hybridization,FISH）在动植物遗传多样性、基因定位等方面应用广泛,是一项重要的研究手段,但由于秋海棠属植物染色体体积小（0.5-5μm）、数目多等原因,分子细胞学的研究难以开展。本文选用施氏秋海棠为植物材料,5S r DNA为探针系统探讨了影响荧光原位杂交实验效果的关键步骤,优化了传统根尖染色体的制片手段,建立了秋海棠属植物荧光原位杂交体系,为秋海棠属植物分子细胞学研究的开展奠定了基础。同时,对形成四季秋海棠品种群的重要野生秋海棠及优良商业品种进行5S r DNA定位研究,在细胞学层面对其遗传关系进行初步探讨。其具体实验结果如下:（1）以三种秋海棠属植物为试验材料,对预处理、酶解时间及染色制片方法等影响染色体制片效果的步骤进行探讨。最佳处理为:取新生粗壮根尖,0.002mol/L 8-羟基喹啉溶液预处理3h,转移至卡诺固定液过夜,最后放入70%的酒精于4℃下长期保存。解离使用混合酶液（2.7%纤维素酶加0.3%果胶酶,p H=4.8）在37℃根据情况处理15-35min,液氮揭片法制片,DAPI染色,荧光显微镜下镜检。（2）以形成四季秋海棠品种群的三种重要野生秋海棠、两种优良商业品种和部分品系作为实验材料,利用优化的制片方法,成功获得清晰的染色体图片,并对其进行核型分析。野生种的染色体均为2n=2X=34,品种‘大花’秋海棠为四倍体,2n=4X=68。（3）建立了秋海棠属植物荧光原位杂交体系。染色体制片预处理:65℃,烘干6h。依次用0.1mg/ml RNA酶处理1h,5μg/ml胃蛋白酶处理10min及4%多聚甲醛固定10min后,用酒精梯度脱水。杂交液体系为25μl,包括50%去离子甲酰胺,10%DS溶液,2×SSC,3-4μl探针DNA及纯水。染色体和探针分开变性,探针96℃10min,染色体70℃下5min-10min。杂交在37℃下孵育12-16h。洗脱后DAPI复染,荧光显微镜下镜检。（4）得到了三种野生秋海棠及两种优良四季秋海棠商业品种的5S r DNA信号分布信息。野生秋海棠的信号分布均成对出现,根据位点数量推测野生秋海棠的进化程度为兜状秋海棠＞施氏秋海棠＞绒毛秋海棠。两个四季秋海棠品种上不成对信号较多,尤其是‘大花’秋海棠,说明其在形成过程中除了染色体的加倍,还有其他种质资源的渗入。本试验建立了秋海棠属植物荧光原位杂交体系,获得了部分秋海棠属植物核型信息及5S r DNA在染色体上的分布信息。为后续秋海棠属植物细胞学研究的开展奠定了技术基础。