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本实验旨在阐明局灶性脑缺血早期不同时段星形胶质细胞在增殖、形态、细胞因子表达,抗氧化功能等方面的变化。为临床治疗该病和进一步解释其发病机理提供依据。临床在急性脑缺血早期常常使用糖皮质激素,但其作用说法不一,确切疗效没有定论,本实验也对糖皮质激素-甲基强的松龙(methylprednisolone,MPSS)的治疗作用做了进一步的研究和评价。
本实验包括两个部分,一部分是体内实验,通过栓塞大鼠大脑中动脉制做局灶性脑缺血模型,以行为学和梗塞灶体积作为模型评价的依据,在此基础上,利用免疫组织化学方法,相邻切片法,检测星形胶质细胞的增殖情况,增生的星形胶质细胞是否表达肿瘤坏死因子-α(TNF-α),利用放射免疫技术,检测损伤侧前脑皮层中TNF-α,白介素-1(IL-1)的含量。利用721分光光度计检测脑组织中谷胱甘肽(GSH),丙二醛(MDA)的含量,在透射电镜下观察血脑屏障的变化。另一部分通过原代细胞培养,纯化星形胶质细胞,在缺血条件下,观察星形胶质细胞的形态,在MPSS干预和不干预两种条件下,检测细胞存活率。
更进一步的实验需要阐明脑缺血后增生的星形胶质细胞和正常状态下星形胶质细胞在功能上有哪些区别。关键词:星形胶质细胞脑缺血损伤动物实验细胞培养甲基强的松龙大鼠