红花是菊科红花属植物红花(Carthamus tinctorius L.)的干燥管状花,具有活血通经、散瘀止痛、降血压和降血脂等功效,在我国已有2500年的药用历史。目前,从红花中己分离得到250多个化学成分,包括黄酮类、生物碱类、聚炔类、烷基二醇类、有机酸类、甾体类、亚精胺类等。亚精胺类化合物即具有H2N(CH2)3NH(CH2)4NH2结构单元的多胺类化合物,显示出了广泛的生物活性,但对此类化合物的生物活性的研究多见于某一个单体化合物,未见系统研究不同构型的亚精胺类化合物的生物活性差异,赵刚等人曾报道亚精胺类化合物N1, N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine对5-羟色胺(5-HT)再摄取有良好的抑制作用,因此,本文旨在分离红花中4个不同构型的香豆酰基取代的亚精胺类化合物,研究4个亚精胺类化合物对5-HT再摄取的抑制作用,初步探讨不同构型的亚精胺类化合物对5-HT再摄取的抑制作用的差异。此外,对亚精胺类化合物的分离以及生物活性的研究已见多篇文献报道,但对亚精胺类化合物的含量测定研究却未见文献报道,因此本文首次建立了可同时测定4个亚精胺类化合物含量的高效液相色谱分析方法,为以后亚精胺类化合物的含量测定研究提供了基础。主要研究工作如下1.亚精胺类化合物分离纯化：首先采用中低压柱色谱对红花乙酸乙酯提取物进行极性分段；利用HPLC-Q- Exactive-MS技术快速寻找亚精胺类化合物所在部位；然后,采用Sephadex-LH 20柱分离、制备型高效液相色谱等方法分离目标化合物；最后,通过ESI-MS数据、HPLC-Q-Exactive-MS结果、以及1H-NMR数据与文献对照等方法,鉴定化合物的结构。最终分离得到4种亚精胺类化合物和一种芳香类化合物以及一种黄酮苷类化合物,分别为N1,N5,N 10-(Z)-tri-p-coumaroylspermidine (1), N1,N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine (2), N1(E)-N5-(Z)-N10-(E)-tri-p-coumaroylspermidine (3), N1,N5,N10-(E)-tri-p-coumaroyl-spermidine (4),紫丁香苷(5)以及山奈酚3-O-芸香糖苷(6)。2.亚精胺类化合物光致异构现象：文献报道反式结构的亚精胺类化合物存在光致异构现象,因此,本文采用HPLC法,观察了各亚精胺类化合物在日光或者254nm紫外光照射下的光致异构现象。结果发现发现各亚精胺类化合物单体在光照条件下可转化为其余三种异构体,并最终以一定比例的混合物的形式存在。光照条件相同时,不同构型的化合物最终可达到同一个平衡状态,光照条件不同时,光致异构化后达到的平衡状态亦不同,即各亚精胺类化合物光致异构化后最终达到的平衡状态因光照条件的不同而不同。此外,在避光条件下各亚精胺类化合物则均较稳定,未有异构现象发生。3.亚精胺类化合物生物活性研究：采用经典的大鼠脑突触体[3H]-5-HT再摄取抑制实验方法,初步研究了4个不同构型的亚精胺类化合物对大鼠脑突触体[3H]-5-HT再摄取的抑制作用,结果显示4个亚精胺类化合物对[3H]-5-HT再摄取皆有抑制作用,但在同一浓度水平下,不同构型的亚精胺类化合物对[3H]-5-HT再摄取的抑制效果不同,全顺式结构的亚精胺类化合物1抑制作用最弱,亚精胺类化合物2和3抑制作用较好。此外,本文利用体外实验方法,利用半自动凝血分析仪,研究了化合物对凝血酶原时间(PT)的影响,结果发现各化合物均无延长PT时间的作用。4.亚精胺类化合物含量测定研究：本文利用高效液相色谱法,以亚精胺类化合物1,2,3,4的含量为考察指标建立了4个亚精胺类化合物的高效液相色谱含量分析方法,该方法可同时测定4个亚精胺类化合物的含量,方法学考察结果显示该方法简便、准确、可靠。