牛支原体HB0801株具有免疫原性分泌蛋白的鉴定

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xingfuli2009
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牛支原体作为新出现的重要病原,可以在世界范围内引起牛发病。其发病的临床症状为肺炎、关节炎、乳房炎、中耳炎、角膜炎。牛支原体是柔膜纲、支原体属中一种重要的致病菌。到目前为止,牛支原体的致病机制还不清楚,目前也没有商业化的疫苗来防控这一牛的重要病原。关于其基因组学研究较为浅显。分泌蛋白作为分泌到胞外的重要毒力因子,可以促进病原对宿主细胞的黏附和侵袭,但是牛支原体分泌蛋白在调节宿主免疫反应和其作为毒力因子的致病机制还有待研究。在提取牛支原体的分泌蛋白组后通过二维电泳和质谱鉴定得出分泌蛋白。根据毒力因子预测数据库(VFDB)预测选取需要验证的分泌蛋白,并选取r Mbov P217蛋白做下一步验证。为了验证r Mbov P217(预测脂蛋白)、r Mbov P310(转运蛋白Sec A)、r Mbov P438(ATP合成酶β亚基)、r Mbov P539(磷酸甘露糖酶),r Mbov P703(Clp protease ATP-binding subunit)这5个蛋白的免疫原性和分泌特性。通过克隆、表达、纯化、制备抗体来验证分泌蛋白,实验结果显示r Mbov P217、r Mbov P438、r Mbov P703为分泌蛋白,且r Mbov P217和r Mbov P703蛋白具有强免疫原性。综上所述,本研究鉴定出牛支原体的两个免疫原性分泌蛋白,可以作为诊断靶标和疫苗候选蛋白。关于这些蛋白在牛支原体感染时发挥的致病机制还需要进一步的研究。
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