复方苦参凝胶杀精避孕及抗炎的实验研究

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第一部分不同配比苦参白头翁乙醇提取物体外杀精的实验研究[目的]研究不同配比苦参白头翁乙醇提取物的体外杀精能力,并探讨其杀精原理。[方法]1.收集15例正常男性的精液标本,经密度梯度离心法处理。浓度为0.5mg/mL的9个不同配比苦参白头翁乙醇提取物药液作用精液标本20s、2min、4min后,用计算机辅助精子分析系统(computer-assisted sperm analysis, CAS A)来评价药液作用后其对精子活力(A+B级)及精子各种运动参数的影响,包括精子曲线运动速度(curvilinear velocity, VCL)、直线运动速度(straight-line velocity, VSL)、平均路径速度(average path velocity,VAP)、精子头侧摆幅度(amplitude of lateral head displacement, ALH)、摆动性(wobble, WOB)及平均移动角度(mean angular displacement, MAD)等;2.使用标本同上,分别检测9种不同配比的苦参白头翁乙醇提取物具有瞬间(20s)杀精能力时的最低有效浓度;3.收集3例正常男性的精液标本用于电镜观察。通过对上述两个步骤的分析找出体外杀精能力最佳的苦参白头翁配比,对其作用后的精液标本进行透射电镜观察,观察精子形态学的变化。[结果]1.以3:1配比的苦参白头翁乙醇提取物,浓度为0.5mg/mL时能明显抑制精子的活力,并且对精子运动参数VCL、VSL、VAP、ALH、WOB及MAD等指标均产生了明显的抑制作用,与对照组比较有统计学意义;2.9个不同配比的乙醇提取物中以3:1配比时,其具有瞬间杀精能力时的最低有效浓度最低,为3.5mg/mL;3.以3:1配比的乙醇提取物作用精液标本后,通过电镜观察发现其精子细胞膜及顶体被破坏,而对照组精子未见明显异常。[结论]苦参白头翁3:1配比时,其乙醇提取物具有最佳的体外杀精能力,且其杀精原理可能与其破坏了精子细胞膜及顶体有关。第二部分复方苦参凝胶节育的体内实验研究[目的]研究复方苦参凝胶体内节育的效果并进行阴道刺激性实验。[方法]1.8周龄雌性SD大鼠60只,随机分为生理盐水组、空白凝胶组、复方苦参凝胶低(0.05g生药/g)、中(0.10g生药/g)、高剂量组(0.15g生药/g)以及壬苯醇醚组(阳性对照)。每晚雌鼠阴道内各给予相应药物200μL,然后与雄鼠按照1:1合笼进行交配,在交配成功后的第12天剖腹观察雌鼠孕株数,并计算避孕率;2.8周龄雌性SD大鼠15只,随机分为生理盐水组、空白凝胶组及复方苦参凝胶高剂量组。每组每晚阴道内给予相应药物各200μL,连续2周,末次给药24h后处死大鼠,取出阴道组织,观察大鼠阴道有无充血、红肿,并进一步行病理组织学检查。[结果]1.与生理盐水组比较,复方苦参凝胶高剂量(0.15g生药/g)组能显著抑制雌鼠的孕株数(0.00±0.00vs11.00±:2.00,P<0.05);而与阳性对照组比较无统计学意义(0.00±0.00vs0.00±0.00,P>0.05),复方苦参凝胶高剂量组避孕率为100%;2.雌鼠阴道连续给药2周后,各组大鼠阴道肉眼观均未见充血红肿,阴道病理组织检查示结构正常无炎症细胞浸润。[结论]复方苦参凝胶有较好的节育作用,并且对阴道局部无不良反应。第三部分复方苦参凝胶抗炎的体内实验研究[目的]研究复方苦参凝胶体内抗炎的效果。[方法]采用小鼠耳廓双面均匀涂抹二甲苯的致炎模型,将60只昆明种小鼠随机分为6组:生理盐水组、空白凝胶组、复方苦参凝胶低(0.05g生药/g)、中(0.10g生药/g)、高剂量组(0.15g生药/g)以及阳性对照组(丙酸氯倍他索乳膏)。各组于每只小鼠右耳双侧均匀涂抹相应药物各50μL,每天1次,连续4天,末次给药后1h,于右耳双侧均匀涂抹100%二甲苯50μL,然后计算小鼠单侧耳的肿胀度及肿胀抑制率。[结果]小鼠耳廓二甲苯致炎模型中,与生理盐水组比较,高剂量组能显著抑制其肿胀程度(10.17+2.56vs21.32±±3.17,P<0.01),与阳性对照组比较无明显统计学差异(10.17±2.56vs8.53±1.89,P>0.05),其肿胀抑制率为52.3%。[结论]复方苦参凝胶有较好的抗炎作用。
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