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H1foo（oocyte-specific linker histone），即卵母细胞特异性的连接组蛋白，是组蛋白家族的成员之一，特异性的定位于哺乳动物卵母细胞和早期胚胎中。在小鼠、牛、猪等体外受精和体细胞核移植过程中均存在H1foo与其它成分的置换，并且这种置换有利于供核体细胞染色质构象的打开，实现基因组的完全重编程，恢复全能性。诱导多能性干细胞技术（iPSC）是另一种区别于体细胞核移植的细胞重编程手段，多项研究表明，开放的染色体结构有利于提高iPSCs的诱导效率并实现基因组的完全重编程。因此，本研究基于早前对猪H1foo的研究积累，在诱导iPSCs的过程中，瞬时表达猪H1foo，探索其对iPSCs诱导效率的影响。本研究选取猪胎儿成纤维细胞（PFF）作为实验材料，通过构建能同时表达OCT4、SOX2、KLF4和c-MYC四因子的DOX调控载体，转染得到稳定的OSKM-PFF。利用电转的方法在OSKM-PFF中瞬时表达猪pVenus-H1foo后添加DOX开启重编程，空载体pVenus转染组作为空白对照。通过对所获得克隆进行鉴定，并对所获iPSCs克隆数进行统计分析，得到如下结果：1.获得能够稳定表达OSKM四因子的OSKM-PFF细胞，利用DOX调控重编程的开启，并能够诱导得到表达多能性标记基因的猪iPSCs。2.利用电转的方法使猪pVenus-H1foo和空载体pVenus分别在OSKM-PFF细胞中瞬时表达，转染效率达60%，且猪pVenus-H1foo在细胞核中定位表达，pVenus在胞质中表达。3.转染有猪pVenus-H1foo和空载体pVenus的OSKM-PFF细胞也获得了一定数量的iPSCs克隆，且能通过碱性磷酸酶染色鉴定并表达多种多能性标记基因。4.统计转染有猪pVenus-H1foo和空载体pVenus的OSKM-PFF细胞中的AP阳性克隆数目，比较发现二者无显著差异。另外，本实验室最初在利用OCT4/SOX2/KLF4/MYC四因子诱导猪胎儿成纤维细胞变为iPSCs的过程中，发现了另外一种细胞—诱导型滋养层母细胞（induced Trophoblast，iTR）。该细胞在诱导过程中出现在猪iPSCs克隆之前，具有上皮细胞表型的集落形成隆起。与iPSCs相比，这些细胞中的滋养层细胞相关转录因子表达上调，如GATA2，DLX3，CDX2，ELF5等，OCT4表达较之猪iPSCs有所下降但仍在整个细胞中持续表达。随后的畸胎瘤实验和胚胎体形成实验均表明，在猪成纤维细胞重编程为iPSCs的过程中，iTR作为该过程中产生的副产品，部分细胞具有自我更新的能力，其中可能含有TR干细胞。因此，我们进一步对所分离的iTR进行传代培养，发现其中含有两种不同表型的细胞类型。分别命名为iTR-Type2和iTR-Type3。对两种细胞的表型与PCR检测结果初步表明，iTR-Type2可能是早期的滋养层干细胞，iTR-Type3为已分化的滋养层细胞。最后，利用Western Blotting和免疫荧光（IF）的方法从蛋白水平对猪iPSCs，iTR-Type2和iTR-Type3这三种细胞进行比较分析。结果发现，iTR-Type2能够表达多能性标记因子POU5F1，早期滋养层相关因子GATA2、GATA3、CDX2等；iTR-Type3能够表达分化相关因子GATA4、SOX17、ELF5等。