放射治疗是头颈部肿瘤的重要治疗手段,耳蜗毛细胞丢失所致的进行性听力下降是头颈部肿瘤放射治疗的重要并发症,严重影响患者生活质量。哺乳动物毛细胞再生能力非常有限,而斑马鱼侧线神经丘毛细胞在耳毒性药物损伤后可以从支持细胞快速再生,现已成为毛细胞再生医学研究的重要模型。本研究的目的旨在探究放射损伤后斑马鱼侧线毛细胞是否依然具有自主再生能力,放射损伤后的信号通路改变,是否可以通过调节再生相关信号促进毛细胞再生,再生细胞的长期活力如何。通过本研究初步明确斑马鱼侧线模型是否可以应用于放射性听力损伤后的再生研究及其特殊之处。方法:应用电离辐射损伤斑马鱼侧线神经丘;应用YO-PRO、SYTOX、BrdU染色分别显示侧线神经丘的毛细胞、支持细胞以及增殖细胞数量变化;应用qRT-PCR、免疫荧光、原位杂交技术显示信号通路改变;应用新霉素和1-azakenpaullone调节信号通路;应用p53突变体斑马鱼研究p53基因对毛细胞再生的影响。放射损伤后斑马鱼侧线神经丘毛细胞丢失和再生过程;激活Wnt通路对放射后神经丘增殖水平和毛细胞再生的影响;筛选毛细胞放射后产生的抑制性Wnt配体;加速放射后毛细胞死亡过程对毛细胞再生能力的影响;观察放射损伤后再生毛细胞的长期活力;p53基因对神经丘放射性毛细胞损伤和再生的影响。放射暴露后,神经丘细胞增殖被显著抑制,支持细胞数量稳定,毛细胞逐渐丢失,未出现损伤后再生。应用Wnt信号激活剂（1-azakenpaullone）可以显著促进放射后神经丘的毛细胞再生。通过qRT-PCR和免疫荧光染色发现,抑制性Wnt配体dkk2在放射后的神经丘表达上调。应用新霉素加速放射后毛细胞的死亡过程也能恢复神经丘的毛细胞再生能力。然而,强迫再生毛细胞后,一部分新生毛细胞几天后逐渐死亡,并且支持细胞的基础增殖活性并未得到改善。P53突变体与野生型斑马鱼放射诱导的侧线毛细胞丢失曲线及神经丘增殖细胞数量变化未见显著差异。以上这些发现提示,斑马鱼侧线神经丘支持细胞相对毛细胞放射抵抗,支持细胞的基础增殖活性放射后显著持久抑制,其再生潜力保存,然而刺激其产生的新生毛细胞活力异常。因此,维持支持细胞的正常功能对于毛细胞再生至关重要。相对常见耳毒性药物诱导的毛细胞死亡过程,放射诱导毛细胞的死亡模式具有独特性,导致了神经丘毛细胞自主再生失败。电离辐射可能通过诱导毛细胞上调分泌诸如dkk2等抗增殖因子抑制支持细胞的Wnt信号,从而抑制斑马鱼侧线神经丘的毛细胞再生。P53与放射诱导的毛细胞死亡及支持细胞增殖抑制无关。