瓜蒌皮多糖的结构表征、磷酸化修饰及其活性研究

来源 :合肥工业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:jiqt001
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本文对瓜蒌皮多糖的提取、分离纯化、结构特征、磷酸化修饰、降血糖活性及抗衰老活性进行了研究,主要结果如下:  采用超声辅助水浴浸提法提取瓜蒌皮多糖,在温度、时间、料液比、功率四个单因素实验的基础上,采用Box-Behnken试验设计获得超声辅助法的最佳提取条件为:温度60℃,时间30 min,料液比1:30(mg/mL),多糖得率为1.91%。  瓜蒌皮水提液经醇沉、脱蛋白、脱色后得到瓜蒌皮粗多糖(TPP),再经Sephadex G-100柱分离纯化,得单一组分TPP-1;高效凝胶渗透色谱检测其为均一多糖,分子量为1.2×105 Da;全水解、乙酰化后经GC-MS分析,表明TPP-1的单糖组分为L-阿拉伯糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖,且其摩尔比为:1.0:3.3:4.3:6.0;高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、部分酸水解、红外光谱、1H NMR谱及13C NMR谱等分析结果表明TPP-1主链由1,4,6-Galp,1,4-Galp,1,3,6-Manp和1,4-Manp构成,支链由1,3-Araf,1-Araf和1-Glcp构成。  采用链脲佐菌素诱导建立高血糖模型小鼠后,以TPP-1灌胃小鼠4周,结果表明,TPP-1高、中、低剂量均使链脲佐菌素高血糖模型小鼠的血糖值分别降低了22.47%、15.38%、12.72%。与阴性对照相比,多糖各剂量组小鼠胰岛素和总超氧化物歧化酶含量明显上升,丙二醛、血清尿素氮、肌酐、甘油三酯、总胆固醇和低密度脂蛋白的含量均不同程度降低,且呈一定的量效关系。结果表明 TPP-1具有良好的降血糖活性。  TPP-1经磷酸化反应进行修饰得磷酸化多糖 P TPP-1,其磷酸根含量为14.36%。红外、13C NMR及31P NMR结果显示该多糖原有的基本结构未发生变化,-H2PO3基团连接在TPP-1的C-4、C-6上。体内抗衰老实验结果表明,100 mg/kg和400 mg/kg的TPP-1均能显著提高D-Gal衰老模型小鼠的体重、脾脏指数和胸腺指数,提高小鼠肝、脑和血清的SOD、GSH-PX及CAT水平,降低其MDA含量,表明TPP-1具有明显的抗衰老活性。与TPP-1相比,相同浓度的PTPP-1对小鼠的抗衰老作用更强,表明瓜蒌皮多糖的磷酸化修饰可以提高其抗衰老活性。
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