目的:甲状腺癌是最常见的甲状腺恶性肿瘤,大约占95%以上,甲状腺癌最早报道于19世纪初期,因为其发病率及死亡率低,在很长的一段时间内并未受到临床上的重视,黄家驷外科学上描述其占全身恶性肿瘤的0.3%(男性)~1.0%(女性),在癌症死亡病例中约占0.5%。甲状腺癌的发病率随着地域、年龄和性别的不同而有所不同。据国际癌症学会资料统计,上个世纪八九十年代,世界上以夏威夷地区发病率最高,女性发病率为8/10万,男性为2.9/10万。而波兰的发病率为最低,女性为1.4/10万,男性为0.4/10万。甲状腺癌在15岁以下儿童比较罕见,女童年发病率约为0.22/10万,男童年发病率率为0.09/10万。我国地处甲状腺癌低发地区,国内缺乏全面的资料统计。天津市曾统计在1983年~1987年的病例资料,结果显示甲状腺癌年平均发病率为1.49/10万,其中男性为0.9/10万,女性为2.0/10万。上海市在1988年报道了甲状腺癌的发病率,男性为0.8/10万,女性为2.2/10万。从上个世纪八十年代到现在,纵观这近二十余年来的各地统计资料发现,甲状腺癌发病率逐渐增加,而死亡率维持稳定。2006年,《美国医学协会杂志》(《The Journal of the American Medical Association》)发表论文报道,自1973至2002年甲状腺癌发病率增加了40%。英国癌症研究中心也在2006年公布,统计2001~2005年间的临床数据发现,甲状腺癌发病率从1975年的1.4/10万上升到2006年的2.9/10万,男女发病率比例为1:3。我国近期也有文献报道,2009年杭州市区恶性肿瘤发病率排行榜上,甲状腺癌排女性恶性肿瘤发病率的第五位。上海市甲状腺癌总发病率从2002年的4.71/10万上升至2006年的9.69/10万,男性发病率从2002年的2.27/10万上升至2006年的4.06/10万,女性发病率从2002年的7.18/10万上升至2006年的15.37/10万。而且由于部分甲状腺癌的患者没有临床症状和体征或者是患有隐匿性甲状腺癌很难在临床上发现,甲状腺癌的实际发生率可能高于临床发现率。总而言之,随着对疾病认识的深入,诊断技术的改进以及患者就诊意识的增强,甲状腺癌的发生率已呈上升趋势。而且到目前,甲状腺癌的发病原因及发病机制仍然没有明确。地区,年龄,性别,电离辐射,遗传,激素以及某些甲状腺疾病例如地方性甲状腺肿,腺瘤等这些因素目前都被认为是与甲状腺癌发生相关的因素。继续深入研究甲状腺癌,寻找与其密切相关的新因素,仍十分必要。近年来,随着肿瘤发病率的增加和研究手段的发展,人们逐渐发现病毒感染和肿瘤的发生有密切关系,并且成为肿瘤发生研究的新热点。1964年Epstein在Burkitt淋巴瘤细胞株中首先发现EB病毒(EBV),经过多年研究,EB病毒是第一个被证实与肿瘤发生有关的病毒。EB病毒是一种普遍存在的疱疹病毒,主要侵犯B细胞,对人的B淋巴细胞,上皮细胞和腺细胞等有亲嗜力,现已在鼻咽癌,何杰金氏病,非何杰金氏淋巴瘤,胃癌,肺癌,乳腺癌等组织中先后检测出EB病毒的基因产物。1987年Begin等报道了首例与EB病毒有关的肺淋巴上皮瘤样癌;1994年HanGK等报道了EB病毒与何杰金氏淋巴瘤之间的关系;1992年Darryl Shibata等研究报道了EB病毒与胃癌的相关性。2006年Hartch Arbach等报道了EB病毒基因在乳腺癌组织的表达。国内外对EB病毒感染与甲状腺癌发生的相关性的研究报道甚少,张廷国等在2000年研究报道了甲状腺肿瘤中EBV-LMP1的表达及意义。本研究旨在检测甲状腺癌组织中是否有EB病毒感染,探讨甲状腺癌的发生是否与EB病毒感染有关。方法:共收集河北医科大学第二医院病理科2009年10月至2011年2月甲状腺肿瘤手术切除标本存档蜡块83例。对每一例标本进行常规HE染色后,经两位病理科医师进行组织病理学观察并做诊断证实。按照WHO甲状腺肿瘤分类标准,分为乳头状癌组,滤泡状癌组,髓样癌组,未分化癌组,同时以甲状腺腺瘤组与甲状腺癌各病理类型分组作对比,取相应肿瘤旁组织作为对照组。联合应用免疫组化SP法检测甲状腺肿瘤组织和相应肿瘤旁正常组织中的EBV-LMP1和原位分子杂交技术检测甲状腺肿瘤组织和相应肿瘤旁正常组织中的EBERs,以期发现EB病毒感染痕迹。用SPSS13.0软件,采用配对χ~2检验、非配对χ~2检验,以及Fisher确切概率法χ~2检验对研究结果进行统计学分析。检验标准为P<0.05有统计学意义。结果:1 LMP-1在甲状腺肿瘤中的表达LMP-1阳性信号位于受检细胞胞浆,结果见附图。各病理类型表达阳性率见附表。LMP-1在乳头状癌表达阳性率为44.1%(15/34),在滤泡状癌中为36.4%(4/11),在未分化癌中为16.7%(1/6),髓样癌组25.0%(1/4)。男性LMP-1表达阳性率为29.4%(5/17),女性为42.1%(16/38)。28例甲状腺腺瘤中见4例LMP-1阳性,阳性率为14.3%.肿瘤旁组织中均未见阳性表达。甲状腺癌各病理类型组间经Fisher确切概率法χ~2检验差异均无统计学意义(各组间均P>0.05),提示LMP-1的表达与病理类型无关。甲状腺癌与甲状腺腺瘤间经非配对χ~2检验,提示差异有统计学意义(χ~2 =5.034,P=0.025<0.05)。LMP-1在甲状腺癌组织中的表达的性别差异无统计学意义(χ~2 =0.802,P=0.371>0.05)。2 EBER-1在甲状腺肿瘤组织中的表达EBERs阳性信号定位于宿主细胞细胞核内,呈棕褐色颗粒,结果见附图,所有阴性对照及空白对照结果无显色,无背景染色干扰。各病理类型表达阳性率见附表。EBER-1在乳头状癌表达阳性率为64.7%(22/34),在滤泡状癌中为45.5%(5/11),在未分化癌中为50.0%(3/6),髓样癌组25.0%(1/4)。男性EBER-1表达阳性率为52.9%(9/17),女性为68.4%(26/38)。28例甲状腺腺瘤中见10例EBER-1阳性,阳性率为46.4%.肿瘤旁组织中均未见阳性表达。甲状腺癌各病理类型组间经Fisher确切概率法χ~2检验差异无统计学意义(各组间均P>0.05)。提示EBER-1的表达与病理类型无关。甲状腺癌与甲状腺腺瘤间经非配对χ~2检验,提示差异有统计学意义(χ~2 =5.828,P=0.016<0.05)。EBER-1在甲状腺癌组织中的表达的性别差异无统计学意义(χ~2 =1.216,P=0.270>0.05)。3甲状腺癌组织中EBER-1表达的阳性率为63.6%(35/55),LMP-1表达的阳性率是38.26%(21/55)。经配对资料χ~2检验法检验提示原位分子杂交法和免疫组化法检测甲状腺癌组织中EBV感染的结果不同,原位分子杂交法阳性率较高。(χ~2 =7.04,P=0.007<0.05)结论:1甲状腺良恶性肿瘤组织中EBV感染阳性率不同,且甲状腺癌组织中阳性率较高,提示EBV感染与甲状腺癌发生之间的关系可能比甲状腺腺瘤发生更密切。2甲状腺癌各病理类型中EBV感染无显著差异,提示EBV感染并非与特定类型癌组织有关。3在针对EBV感染的研究中,原位分子杂交法比免疫组化法检出率高,更敏感。