微藻具有繁殖快、易于分离培养、可直接观察细胞水平中毒症状等优点，是良好的毒性试验材料，广泛用于各种毒物的毒性试验研究。杜氏盐藻由于富含天然β-胡萝卜素以及能忍受各种极端环境而备受关注。本文以盐藻作为受试生物，初步探讨几种重金属、化学农药以及四氯化碳对杜氏盐藻的毒性研究。主要研究内容如下： 1 五种重金属胁迫盐藻的毒性研究 根据不同浓度的铅、汞、铬、镉、镍离子胁迫盐藻生长的影响，分别采用二分法选定合适的浓度区间，配置六个不同胁迫浓度的盐藻培养液。Pb<2+>浓度0g/L、0.05g/L、0.1g/L、0.15g/L、0.2g/L、0.25/L，Hg<2+>浓度为0 g/L、0.05g/L、0.10g/L、0.15g/L、0.20g/L、0.25g/L，Cr<2+>浓度0g/L、0.15g/L、0.25g/L、0.35g/L、0.45g/L、0.55g/L，Cd<2+>浓度为0g/L、0.20g/L、0.25g/L、0.30g/L、0.35g/L、0.40g/L，Ni<2+>浓度为0 g/L、0.20g/L、0.25g/L、0.30g/L、0.35g/L、0.40g/L。每一天定时测定盐藻的细胞数、生物量、β-胡萝卜素、超氧物歧化酶(SOD)活性以及过氧化氢酶(CAT)活性。根据为期八天的毒性试验，观察分析盐藻的细胞数、生物量、β-胡萝卜素含量、超氧物歧化酶(SOD)活性以及过氧化氢酶活性(CAT)的变化。 (1) 当pb<2+>浓度为0.05g/L时，对盐藻的生长影响很小；当Pb<2+>浓度为0.1g/L、0.15g/L、0.2g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-7天的适应后开始稳步回升；当pb<2+>浓度为0.25g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。而随着。pb<2+>胁迫浓度的提高，盐藻的SOD活性持续下降，CAT的活性先增大后减小，浓度为0.15g/L时活性达到最大。 (2) 当Hg<2+>浓度为0.05g/L、0.1g/L时，对盐藻的生长影响很小；当Hg<2+>浓度为0.15g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过4-6天的适应后开始稳步回升；当Hg<2+>浓度为0.2g/L、0.25g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。而随着Hg<2+>胁迫浓度的提高，盐藻的SOD活性持续下降，CAT的活性先增大后减小，浓度为0.15g/L时活性达到最大。 (3)当Cr<,2+>浓度为0.15e/L时，对盐藻的生长影响很小；当Cr<2+>浓度为0.25g/L、0.35g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-7天的适应后开始稳步回升；当Cr<2+>浓度为0.45g/L、0.55g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。 (4) 当Cd<2+>浓度为0.2g/L时，对盐藻的生长影响很小；当Cd<2+>浓度为0.25g/L、0.3g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-7天的适应后开始稳步回升；当Cd<2+>浓度为0.35g/L、0.4g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。 (5)当Ni<2+>浓度为0.1g/L时，对盐藻的生长影响很小；当Cd<2+>浓度为0.3g/L、0.5g/L、0.7g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-7天的适应后开始稳步回升；当Cd<2+>浓度为0.9g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。 2 四种化学农药胁迫盐藻的毒性研究 根据不同浓度的敌百虫、敌敌畏、杀虫双、灭扫利胁迫盐藻生长的影响，分别采用二分法选定合适的浓度区间，配置六个不同胁迫浓度的盐藻培养液。敌百虫浓度为0g/L、0.005g/L、0.015g/L、0.025g/L、0.035g/L、0.045g/L，敌敌畏浓度为0 g/L、0．01g/L、0.02g/L、0.03g/L、0.04g/L、0.05g/L，杀虫双浓度为0g/L、0.005g/L、0．015g/L、0.025g/L、0.035g/L、0.045g/L，灭扫利浓度为0 g/L、0.03g/L、0.05g/L、0.05g/L、0.07/L、0.09g/L、0.11g/L。每一天定时测定盐藻的细胞数、生物量、β-胡萝卜素、超氧物歧化酶(SOD)活性以及过氧化氢酶(CAT)活性。根据为期八天的毒性试验，观察分析盐藻的细胞数、生物量、β-胡萝卜素含量、超氧物歧化酶(SOD)活性以及过氧化氢酶活性(CAT)的变化。 (1) 当敌百虫浓度为0.005g/L、0.015g/L时，对盐藻的生长影响很小；当敌百虫浓度为0.0258/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过6-8天的适应后开始稳步回升；当敌百虫浓度为0.035g/L、0.045g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。而随着敌百虫胁迫浓度的提高，盐藻的SOD活性持续下降，CAT的活性先增大后减小，浓度为0.025g/L时活性达到最大。 (2) 当敌敌畏浓度为0.01g/L时，对盐藻的生长影响很小；当敌敌畏浓度为0.02g/L、0.03g/L、0.04g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-8天的适应后开始稳步回升：当敌敌畏浓度为0.058/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。 (3) 当杀虫双浓度为0.2g/L、0.48/L时，对盐藻的生长影响很小；当杀虫双浓度为0.6g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-7天的适应后开始稳步回升；当杀虫双浓度为0.8g/L、1.0g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。 (4)当灭扫利浓度为0.03g/L时，对盐藻的生长影响很小；当灭扫利浓度为0.05g/L、0.07g/L、0.09g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素显著下降，在经过5-7天的适应后开始稳步回升；当灭扫利浓度为0.11g/L时，盐藻细胞数、生物量、β-胡萝卜素一直下降直至死亡。 3．四氯化碳胁迫盐藻的毒性研究 在不同CCl<,4>浓度对杜氏盐藻的毒性实验中，发现当CCl<,4>浓度达到0.32％时，5天之后检测不出细胞生物量和β-胡萝卜素含量。但是在98天后盐藻重新恢复生长，细胞生物量和β-胡萝卜素累积量在25天内恢复到实验前水平。表明表面致死的盐藻细胞经过一段时间可以适应毒物的作用而恢复生长。利用随机扩增多态性DNA(RAPD)技术对正常生长的盐藻和CCl<,4>作用后重新生长的盐藻进行多态性分析。用DNA池法对29个10聚随机引物进行多态性扩增和筛选，其中有2条引物可获得清晰且重复性良好的DNA多态性条带，初步说明毒物作用导致了盐藻DNA的某种变异，而这种变异使盐藻适应了毒物环境。