目的:研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)联合谷氨酰胺酶抑制剂CB-839对伊马替尼耐药K562细胞(K562/G细胞)增殖及凋亡的影响,为耐药慢性粒细胞白血病患者的的治疗提供新思路。方法:以K562/G细胞为研究对象。1.CCK8法检测不同浓度CB-839及EGCG单独或联合应用对K562/G细胞增殖活性的影响,计算不同药物组的细胞增殖抑制率,并应用Chou-Talalay联合指数法研究CB-839与EGCG联合应用的效果,采用CalcuSyn软件计算两药合用指数(Combination Index,CI),分析两药联合是否具有协同药效。选择协同作用最大的组合进行后续实验。2.采用流式法检测对照组、CB-839组、EGCG组及联合药物组细胞周期分布情况和细胞凋亡率变化。4.Western blot法检测对照组、CB-839组、EGCG组及联合药物组细胞Bcl-2、Bax及LC3B蛋白表达情况。结果:1.CCK8结果显示:不同浓度CB-839及EGCG均可一定程度上抑制K562/G细胞增殖(P<0.05)。CB-839组(1.25、2.5、5μmol/L)分别联合EGCG组(40、80、120μmol/L)作用于K562/G细胞,结果显示联合组细胞增殖抑制率较对照组及单药组明显升高(P<0.05)。CompuSyn软件分析结果显示所有联合药物组CI值均<1,说明两药具有协同作用。当CB-839为5μmol/L,EGCG为80μmol/L时,CI值最小,协同作用最大,取该联合药物组浓度进行后续实验。2.流式检测细胞周期结果显示:与对照组相比,CB-839单独应用对K562/G细胞周期无影响(P>0.05),EGCG组细胞周期G2期细胞比例升高(P<0.05);联合用药组G2期细胞比例较对照组及单药组均明显升高(P<0.05)。流式分析凋亡率结果显示:与对照组相比,CB-839组K562/G细胞凋亡率无显著性差异(P>0.05);EGCG组凋亡率明显升高(P<0.05);联合用药组凋亡率较对照组及单药组均明显升高(P<0.05)。3.Western Blot结果显示:与对照组相比,联合药物组Bax蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值明显升高(P<0.05);CB-839组及EGCG组LC3B-II/LC3B-I比值无显著差异(P>0.05);联合药物组LC3B-II/LC3B-I比值降低(P<0.05)。结论:CB-839可一定程度上抑制K562/G细胞增殖,但不能诱导凋亡发生;CB-839单独应用抗肿瘤活性有限,但与EGCG联合应用后抗细胞增殖及促凋亡作用显著增强,表现出良好的协同效应,可能与共同阻滞细胞周期、影响Bax/Bcl-2比值及调节自噬相关。