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目的:(1)比较手术前后、使用三黄煎剂前后的围手术期乳腺癌患者肠道菌群的群落组成差异性,寻找优势菌群,明确三黄煎剂所产生的有益影响。(2)通过监测手术前后以及使用三黄煎剂前后患者外周血T细胞亚群变化及血清IL-1 β、IL-17、IFN-γ的含量,探索三黄煎剂对于乳腺癌患者因围手术期应激产生的免疫、炎症紊乱的改善作用。(3)通过中医症状积分量表、术后康复量表,明确三黄煎剂改善脾虚血瘀证症状、促进乳腺癌患者术后康复的疗效。方法:选取2020年11月11日-2021年12月31日于江苏省中医院乳腺外科住院拟行手术治疗的乳腺癌患者20例,10例为治疗组,10例为对照组。两组患者均行乳腺癌改良根治术或乳房单纯切除术/乳房皮下腺体切除术/乳房皮下腺体切除及扩张器置入术及前哨淋巴结活检,术中活检阳性加行腋下淋巴结清扫。住院期间给予受试者规定饮食,对照组采取基础治疗,治疗组术后加服三黄煎剂7天。于术前、术后第1天、术后第7天进行中医脾虚血瘀证证候积分量表及术后康复量表的填写、以及外周血检测(T细胞亚群、IL-17A、IL-1β、IFN-γ)。于术前与术后第6±1天进行粪便采集,通过16srDNA测序技术进行分析对比受试者用药前后以及术前术后肠道菌群群落组成差异。数据符合正态分布及近似正态分布时,组内采用配对t检验比较,组间采用独立样本t检验比较,不符合正态分布时采用非参数检验;根据具体情况选用卡方检验或Fisher确切概率法比较等级资料;对同一观察单位在不同时间重复进行多次测量数据符合正态分布或近似正态分布时使用重复测量方差分析,检验是否符合球形分布,选择分析方法;不符合正态分布时选用非参数检验。肠道菌群部分使用metastats分析(非参数检验及Bonferroni校正)、Lefse分析(非参数Kruskal-Wallis秩和检验、Wilcoxon秩和检验等)、Amova及Anosim分析。结果:(1)手术可显著加重患者脾虚血瘀证症状。结果显示影响最大的是睡眠质量以及患者食欲,随着术后时间延长,脾虚血瘀证症状可依靠机体自身得到改善,与术后未口服中药煎剂的患者相比,三黄煎剂可以有助于缓解术后患者脾虚血瘀证症状,使患者术后更快恢复至术前水平,显效较明显的症状为乏力、失眠及食欲或纳呆。(2)手术可使患者术后康复量表积分降低(积分越高生存质量越好),严重影响乳腺癌患者生活质量,其中除情绪控制及上肢水肿外,其余各单项在术后积分均有不同程度的降低。而与术后未口服中药煎剂的患者相比,口服三黄煎剂组患者术后康复积分更高,生存质量更好,体现了三黄煎剂可协助乳腺癌患者术后康复,提高生存质量。(3)本次研究中的40份粪便样本中,共发现主要有5个门,10个纲,10个目,17个科,36个属。(4)在肠道菌群门水平上,对照组术前与术后无显著差异;治疗组术后Actinobacteria(放线菌门)较术前显著增多;其余组间及时间点群落差异对比均不显著。术后两组间除优势群落外,Planctomycetes(浮霉菌门)、Chloroflexi(绿弯菌门)、Armatimonadetes(装甲菌门)、WS6、Ignavibacteriae、Acidobacteria(酸杆菌门)、Chlorobi(绿菌门)、Nitrospirae(硝化螺旋菌门)、WoesearchaeotaDHVEG-6(乌斯古菌门)、Synergistetes(互养菌门)在术后治疗组中较多,两组间差异较大,但群落相对丰度极低。(5)在肠道菌群纲水平上,对照组术前与术后无显著差异;治疗组术后Actinobacteria(放线菌纲)较术前显著增加,还有一种丰度较少的Ardenticatenia菌纲,术后也有显著增加;术前治疗组与对照组间纲水平群落中Anaerolineae(厌氧绳菌纲)差异较大,但是含量极低;术后对照组与术后治疗组纲水平上主要群落中,Negativicutes(厚壁菌纲)、Betaproteobacteria(β-变形菌纲)、Anaerolineae(厌氧绳菌纲)在治疗组中相对丰度大于对照组。除以上优势群落外,还有26种相对丰度极少的群落具有统计学差异。(6)在肠道菌群属水平上,对照组术前与术后群落相对丰度无显著差异;治疗组术后Bifidobacterium(双歧杆菌属)丰度远大于术前,其余群落差异不显著;术前治疗组中Megamonas(巨单胞菌属)、Ruminococcus2(瘤胃球菌属2)、Parasutterella(副沙门氏菌属)相对丰度远大于对照组,差异显著;术后治疗组属水平中发现Megamonas(巨单胞菌属)、Megasphaera(巨球型菌)、Parasutterella(副沙门氏菌属)、Dialister(小杆菌属)、Klebsiella(克雷伯氏菌)相对丰度远大于对照组,而Ruminococcustorquesgroup(扭链瘤胃球菌属)在对照组中丰度增加。(7)通过Alpha多样性分析与Beta多样性分析后发现本次测序抽样的测序量充足,四组样本物种的丰度一致、多样性较低、分布不均匀,组间样本群落的组成也较为相似。(8)在T细胞亚群中,对照组与治疗组CD4+T细胞在各时间点差异及组间差异均不显著;在术后第1天,对照组与治疗组CD8+T细胞有显著差异,可能由个体差异所致,两组数据在其余各时间点差异及组间差异均不显著;对照组与治疗组CD3+T细胞在各时间点差异及组间差异均不显著;对照组与治疗组CD4+/CD8+T细胞比值在术后第7天有显著差异,对照组中比值较治疗组大,其余各时间点间及组间均无显著差异。(9)在血清炎症因子中,对照组与治疗组IL-17A、IL-1β、IFN-γ在各个时间点差异及组间差异均无显著统计学意义,但在IL-17A与IFN-γ变化趋势图中可见样本的异常变化趋势。结论:三黄煎剂对改善围手术期乳腺癌患者脾虚血瘀证症状有显著作用,亦可以提高患者术后生活质量。三黄煎剂可以提高乳腺癌患者术后有益菌丰度,减少有害菌丰度,提高了乳腺癌患者术后Actinobacteria(放线菌门)、Actinobacteria(放线菌纲)、Bifidobacterium(双歧杆菌属)、Negativicutes(厚壁菌纲)丰度,减少 Peptoclostridium(胃梭菌属)丰度,在提高乳腺癌患者术后Dialister(小杆菌属)、Ruminococcus2(瘤胃 球菌属2)、Betaproteobacteria(β-变形菌纲)丰度以及降低Ruminococcustorquesgroup(扭链瘤胃球菌属)丰度上具有创新发现,对炎症因子IL-17A与IFN-γ有改善潜力。对围手术期乳腺癌患者而言,服用三黄煎剂可以改善肠道菌群,有着间接对炎症微环境产生作用的可能性。根据本研究测序结果,在未来的研究中也许对术后代谢情况、肥胖亦或是心理抑郁具有改善作用,体现中医药优势。