论文部分内容阅读
低聚果糖,是果糖基经β-(2→1)糖苷键连接而成,聚合度为2-9的功能性低聚糖。目前,食品中添加的低聚果糖,主要是通过人工酶解的方法制备,根据其来源分为蔗糖来源低聚果糖和菊粉来源低聚果糖两种。其中蔗糖来源低聚果糖的主要成分是蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖,菊粉来源低聚果糖的主要成分是果果三糖、果果四糖和果果五糖。由于目前尚无商业化的果果三糖、果果四糖和果果五糖的纯品,因此当前对低聚果糖的定量只能通过酶解的方法将所有成分全部变为果糖单体后进行粗略定量。这也导致当前食品中低聚果糖的检测方法普遍存在着定量结果不准确,重现性差等不足。因此,建立食品中低聚果糖的快速和准确检测方法是一项富有挑战性的工作。对于果果三糖、果果四糖和果果五糖各组分的分离纯化,报道的方法存在着分离效果差,纯化时间长的不足。本研究通过综合使用两种凝胶渗透色谱柱进行分离,示差折光检测器进行检测,高效分离制得了果果三糖、果果四糖和果果五糖3个单组分的纯品。利用高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测法分析果果三糖、果果四糖的纯度达到了95%以上,果果五糖纯度虽然较低,但其杂质主要是蔗果五糖,可以通过计算进行减扣,不影响定量分析。对于食品中的低聚果糖含量的检测,报道的方法存在着前处理复杂,分离效果不佳,重现性差的不足。本研究通过对前处理条件和色谱分离条件进行系统优化,建立了一种简单、快速、灵敏的高效阴离子交换色谱-脉冲安培检测的分析方法。样品经去离子水提取,On Guard II RP柱净化,Carbo Pac PA 200阴离子交换色谱柱分离。采用水、0.2 mol/L Na OH溶液和0.4 mol/L Na Ac溶液三元梯度淋洗,流速为0.4 m L/min,柱温30°C,进样量25μL。基于已建立的果果三糖、果果四糖和果果五糖纯品的制备方法和食品中低聚果糖的检测方法,本研究测定了经常添加低聚果糖的四类食品,包括乳粉、婴幼儿配方米粉、挂面以及固体饮料中低聚果糖的含量。蔗果三糖、四糖、五糖和果果三糖、四糖、五糖的质量浓度在0.05~10 mg/L范围内线性关系良好,相关系数>0.9980。蔗果三糖、四糖、五糖和果果三糖、四糖、五糖的定量限分别是0.07,0.02,0.04,0.02,0.03,0.10 mg/L。在低、中、高三个添加水平下,生鲜乳、米粉和面粉中蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖、果果三糖、果果四糖和果果五糖的回收率介于81.8%-118.2%之间,相对标准偏差(RSD)小于4.9%。本研究建立的方法样品处理简单,结果准确,灵敏度高,已成功应用于四类食品中蔗糖来源和菊粉来源低聚果糖的同时精确测定。