【摘 要】
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目的:观察十全育真汤对非小细胞肺癌的治疗作用,并探讨十全育真汤治疗非小细胞肺癌可能作用机制及物质基础。方法:1通过图书馆文献查阅以及中国知网、万方、Pubmed等国内外文献网站数据库查阅与十全育真汤及各组分单药得相关资料,对十全育真汤的临床研究及实验研究进行整理。2网络药理学探讨十全育真汤作用于非小细胞肺癌的活性成分及其作用机制,通过相关数据库筛选十全育真汤方主要活性成分、靶点和非小细胞肺癌疾病基
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目的:观察十全育真汤对非小细胞肺癌的治疗作用,并探讨十全育真汤治疗非小细胞肺癌可能作用机制及物质基础。方法:1通过图书馆文献查阅以及中国知网、万方、Pubmed等国内外文献网站数据库查阅与十全育真汤及各组分单药得相关资料,对十全育真汤的临床研究及实验研究进行整理。2网络药理学探讨十全育真汤作用于非小细胞肺癌的活性成分及其作用机制,通过相关数据库筛选十全育真汤方主要活性成分、靶点和非小细胞肺癌疾病基因,进行关键活性成分和靶标筛选,并利用Cytoscape软件和String数据库等工具进行网络分析,DAVID6.8进行GO及KEGG通路富集。3 a造模:C57BL/6小鼠右侧腋下接种Lewis肺癌细胞建立Lewis肺癌荷瘤小鼠模型,随机分为模型组和十全育真汤低、中、高剂量组（8.7g/Kg、17.4g/kg、34.8g/kg）,连续灌胃给药17日,1次/d,另设置空白对照组。b.记录荷瘤小鼠肿瘤大小以及质量,绘制生长曲线,观察十全育真汤作用;通过TUNEL法观察肿瘤细胞凋亡情况,利用试剂盒检测caspase-3、caspase-8和caspase-9活性;使用苏木素-伊红（HE）染色及免疫荧光法检测荷瘤小鼠移植瘤中血管内皮标记物（CD31）的表达水平,间接观察肿瘤微血管密度（Microvessel density,MVD）;利用Western-Blot法检测十全育真汤对瘤体血管内皮生长因子A（VEGFA）、缺氧诱导因子1α（HIF-1α）血管生成相关蛋白的表达影响。c.对荷瘤鼠进行行为学观察,观察各组小鼠饮食情况、反应灵敏度、有无毛发脱落以及聚集情况,并记录各组荷瘤小鼠体重变化情况。计算各组荷瘤小鼠脾脏指数及胸腺指数等免疫脏器指数,并利用Elisa法检测荷瘤小鼠肿块组织中IL-6及血清中TNF-α等炎症相关因子的表达,以及荷瘤小鼠血浆中凝血因子Ⅶ,t-PA,PAI-1等凝血纤溶相关因子的表达。结果:1十全育真汤的现代研究资料较少,但已有资料还是可以在一定程度上证明十全育真汤对恶性肿瘤具有一定治疗意义的。2十全育真汤中筛选出槲皮素、木犀草素和山奈酚等26个满足类药性评估的关键活性化合物,以及182个十全育真汤的主要作用靶标。多层次网络模型分析显示,十全育真汤可以调控非小细胞肺癌疾病靶基因网络;GO功能及KEGG的富集分析显示,靶基因主要涉及PI3K-Akt信号通路、P53信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路和VEGF信号通路等15条关键通路;PPI网络分析显示十全育真汤治疗NSCLC的核心靶点主要集中在细胞增殖、凋亡、炎症、血管生成及细胞周期等方面。3 a.十全育真汤能够抑制荷瘤小鼠肿瘤生长（P＜0.05）,诱导肿瘤细胞凋亡,显著提高Caspase-3、Caspase-8和Caspase-9的活性（P＜0.05）。b.一定剂量浓度的十全育真汤能够显著抑制移植瘤组织微血管形成,并且能够明显抑制VEGFA和HIF-1a等血管生成相关蛋白的表达。c.通过观察发现十全育真汤能够改善小鼠饮食及活动灵敏度等,对体重无明显影响;十全育真汤能够明显提高荷瘤小鼠脾脏指数,但对胸腺指数无明显影响;Elisa法表明十全育真汤能够抑制肿瘤组织中IL-6的表达,提高血清中TNF-α的表达,降低小鼠血浆中凝血因子Ⅶ,PAI-1等凝血纤溶相关因子的表达。结论:十全育真汤能够显著改善Lewis肺癌荷瘤鼠生活质量,抑制小鼠肿瘤生长。结合网络药理学与动物实验验证提示,十全育真汤能够改善荷瘤小鼠凝血状态,并通过提高小鼠免疫力,抑制肿瘤微血管等方式诱导肿瘤组织凋亡从而达到治疗非小细胞肺癌的作用。
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