玉米真菌毒素检测技术的建立及其应用研究

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真菌毒素是由产毒真菌在新陈代谢过程中产生的次级活性代谢产物,部分具有致癌、致畸和致突变的作用。玉米是世界第一大农作物,2015年我国玉米总产量约为2.197亿吨,除一部分作为粮食和食品加工外,约70%用作饲料。目前,玉米真菌毒素污染问题已成为世界各国高度关注的食品安全热点问题。受气候条件和储藏条件等因素的影响,每年山东受真菌毒素污染造成的粮油损失累计约3100万吨,因此开展山东省玉米真菌毒素检测技术和污染状况研究对于保障山东省粮食安全具有重要的现实意义。本研究以山东省为检测区域,在2013年度-2014年度采集了山东省13个玉米主产县收获期和储藏期共520批次玉米样品,分析了影响玉米质量安全的几种主要真菌毒素(玉米赤霉烯酮、黄曲霉毒素、伏马毒素和脱氧雪腐镰刀菌烯醇)的危害及当前的限量标准,检测了玉米中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、伏马毒素B1、伏马毒素B2、伏马毒素B3、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮9种真菌毒素的污染水平,提出了保障玉米质量安全的建议和对策,为掌握山东省玉米的真菌毒素污染状况,评估污染带来的安全风险提供了数据支撑。主要研究方法及结果如下:1.建立了基于分散型固相萃取法结合液相色谱-飞行时间质谱联用仪方法同时检测玉米中黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2、伏马毒素B1、伏马毒素B2、伏马毒素B3、脱氧雪腐镰刀菌烯醇和玉米赤霉烯酮等9种真菌毒素的分析方法。样品经乙腈/水提取液(84/16,V/V,含1%冰乙酸)提取,C18净化剂净化后,提取液经氮吹干后用甲醇/水(5/5,V/V)复溶,再采用电喷雾正离子模式(ESI+)进行检测,以保留时间和精确分子质量数定性,以TOF MS提取离子的峰面积定量。(1)9种真菌毒素的质量精确度均小于4ppm,相关系数R2均大于0.99,回收率为68.0%-120.0%之间,相对标准偏差在0.18%-6.29%之间,均小于10%。(2)最低检出限分别为黄曲霉毒素B1 (0.05μg/kg)、黄曲霉毒素B2 (0.05μg/kg)、黄曲霉毒素G1 (0.05μg/kg)、黄曲霉毒素G2 (0.05μg/kg)、伏马毒素B1 (5μg/kg)、伏马毒素B2 (5μg/kg)、伏马毒素B3 (5μg/kg)、玉米赤霉烯酮(12μg/kg)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇50μg/kg)(3)定量限分别为黄曲霉毒素B1 (0.1μg/kg)、黄曲霉毒素B2 (0.1μg/kg)、黄曲霉毒素G1 (0.1μg/kg)、黄曲霉毒素G2 (0.1μg/kg)、伏马毒素B1 (15μg/kg)、伏马毒素B2(15μg/kg)、伏马毒素B3(15μg/kg)、玉米赤霉烯酮(25μg/kg)、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(200μg/kg)。综上所述,表明该检测方法具有更快捷、更准确、节约时间和成本的优点,适用于日常玉米中真菌毒素含量的检测。2.采用上述方法对山东省玉米13个主产县2013年度-2014年度收获期和储藏期共520批次玉米样品进行检测。(1)黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1在玉米中检出率和平均含量分别为18.08%、7.62μg/kg;7.88%、0.60μg/kg;0.77%、0.05μg/kg;而黄曲霉毒素G2均为未检出;伏马毒素B1、伏马毒素B2、伏马毒素B3为92.50%、1798.69μg/kg;88.08%、 531.83μg/kg;83.85%、197.71μg/kg;脱氧雪腐镰刀菌烯醇为26.35%、240.44μg/kg;玉米赤霉烯酮为14.62%、74.90μg/kg。(2)调查结果还表明伏马毒素在所测样品中污染最为严重,超标率达33.46%。
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