Livin在胃癌中的表达及其基因转染对胃癌细胞生长的影响

来源 :广州中医药大学 | 被引量 : 3次 | 上传用户:dextersky001
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背景Livin是凋亡抑制蛋白家族的成员之一,在大多数正常成人组织中,Livin蛋白不被表达或低表达,但在许多研究中发现其在一些恶性肿瘤组织中呈高表达,被认为是一些肿瘤不良预后的独立指标。有研究表明,在胃癌组织检测到Livin蛋白表达,与正常胃组织和癌旁组织相比,胃癌组织中Livin mRNA表达显著上调,并与胃癌的组织分化程度及淋巴结转移有关。以上均提示Livin蛋白的表达可能随胃癌的发生、发展过程中胃黏膜的组织学分化改变而上调。此研究以此为背景及基础,进一步探讨Livin与胃癌发生发展及其与中医辨证的关系。目的1分析Livin蛋白在胃癌、胃溃疡、慢性胃炎及癌旁组织中表达的差异,探讨其在胃癌发生、发展中的意义;2探讨Livin蛋白表达与胃癌临床特征的关系;3分析Livin蛋白表达与中医“胃癌”辨证分型的关系;4分析Livin基因转染对MGC-803胃癌细胞株的细胞生长速度、细胞周期等影响。方法1收集广州军区广州总医院2008年至2012年在消化内科或普通外科住院,并行电子胃镜检查或通过外科手术行病理活检,经病理确诊为慢性胃炎患者30例,胃溃疡患者36例,胃癌患者54例,同时获取癌旁组织31例,共151例,其中胃癌患者采集标本前均未行放疗、化疗。癌旁组织定义为,通过病理证实的,取自距胃癌组织边缘5cm以上的,无肿瘤细胞浸润、无明显炎症并且无明显细胞增生等病变的胃黏膜组织。2上述胃癌患者住院期间皆经中医辨证诊断为中医“胃癌”,结合中医“望闻问切”四诊,对入选病例进行辨证分型。3采用免疫组化SP法检测各中不同病变组中Livin蛋白的表达,并对阳性率进行分析。4通过脂质体法转染外源性Livin基因至MGC-803胃癌细胞株,RT-PCR检测Livin mRNA的表达,MTT法比较转染前后细胞生长曲线,流式细胞术检测细胞周期变化。5应用统计学软件SPSS13.0分析上述指标的统计学意义。结果1胃炎组织、胃溃疡组织、癌旁组织、胃癌组织Livin蛋白阳性表达率分别为0.00%、8.33%、22.58%及85.19%。胃癌组织Livin蛋白阳性表达率高于胃炎、胃溃疡及癌旁组织。2Livin蛋白的表达率与性别、年龄、淋巴结转移无相关性,与组织分化程度、细胞病理类型相关,低分化组织表达率高于高分化,印戒细胞癌组织表达率高于腺癌。3本组胃癌患者中医证型以“气血两虚证”为主(51.85%),该证型Livin阳性率明显高于其它证型。4成功转染Livin重组载体至MGC-803胃癌细胞株并通过RT-PCR检测到LivinmRNA的表达。5转染Livin基因后细胞增殖率显著增高。6Livin转染组胃癌细胞比阴性转染组及空白对照组处于GO/G1期细胞数比例减少,增殖指数升高,凋亡率降低。结论Livin蛋白与胃癌的发生与发展具有相关性,转染Livin基因可以促进胃癌细胞增殖并抑制其凋亡,对此深入研究可能对早期胃癌的筛查、防治及预后判断有积极意义。本组胃癌患者中医证型以“气血两虚证”为主,大部分胃癌患者存在气血两虚的情况,气血两虚患者体内可能存在Livin表达异常,导致胃癌的发生。
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