近年来，人们对肿瘤坏死因子超家族(Tumor necrosis factor superfamily,TNFSF)和肿瘤坏死因子受体超家族(Tumor necrosis factor receptor superfamily,TNFRSF)的研究日趋增多。TNFSF／TNFRSF不仅广泛参与哺乳动物的不同生物学功能，而且还与多种疾病的病理损伤有关。TNF相关的凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis-inducing ligand,TRAIL)是于1995年发现的TNFSF成员。TRAIL有五种受体，分别为DR4、DR5、DcR1、DcR2和Osteoprotegerin(OPG)。DR4和DR5胞浆区具死亡结构域(Death domain,DD)，与TRAIL结合后可介导细胞凋亡。DcR1和DcR2缺乏胞浆区或无完整的死亡结构域，因而不具有介导细胞凋亡的功能，但可与DR4和DR5竞争结合TRAIL而抑制TRAIL的凋亡诱导功能。OPG是一种分泌形式的受体，与TRAIL结合后也可抑制其凋亡诱导功能。 以往的研究表明，在诱导凋亡的TNFSF／TNFRSF中，FasL／Fas及TNF／TNFR Ⅰ可能参与了肾脏移植排斥反应。本文研究了肾脏移第四军医大学硕士学位论文植患者TRAIL及其受体DR4和DRS表达水平的变化，旨在研究这些分子在肾脏移植排斥反应中的分子机制。本实验应用免疫组织化学染色技术检测移植排斥肾脏中TRA工L、DR4及DRS的表达水平;应用夹心EL工SA检测肾脏移植患者血清STRAIL水平。结果表明移植排斥肾脏中TRAIL、DR4及DRS的表达水平较之正常肾脏组织明显升高。肾脏移植患者血清sTRAIL水平明显高于正常人(凡0.001)。提示TRAIL及其受体 DR4和DRS有可能参与肾脏移植排斥反应的发生。 许多免疫细胞膜分子存在其可溶型形式，其产生机制可以是通过细胞直接分泌，也可以由一些蛋白酶水解跨膜分子的胞膜外区，使其脱落形成。可溶型膜分子在免疫功能的调节中有重要的作用，而且发现部分可溶型膜分子与一些疾病的发生和发展有关。 TRA工L属11型跨膜蛋白，分子量32.skDa，由281个氨基酸组成。N端位于胞浆内，与其他TNFSF成员无同源性。C端位于胞膜外，结构较为保守，与FasL、TNF一Q的同源性分别为28%和23%。TRAIL的胞膜外区存在蛋白酶作用位点，可被相应的蛋白酶从膜上切下，形成分子量约为19kDa可溶型的单体，单体TRAIL分子具有高度的寡聚化倾向，可自发形成二聚体或三聚体。TRAIL形成与T郑的受体结合区相似的三聚体蛋白，其间包埋一个锌离子。可溶型TRAIL(Soluble TRAIL，sTRAIL)的这种特性使得应用同一株单抗建立EL工SA检测方法成为可能。形成三聚体的TRAIL分子中具有三个重复表位，如果不考虑空间位阻，当捕获抗体(CaPtureantibody)与其中的一个表位结合后，还有两个同样的表位可以和检测抗体(Deteetion antibody)相结合。我们成功地建立了同一株单抗夹心检测STRAIL的方法，其灵敏度可达60pg/m1。该方法的建立为进一步研究STRAIL与疾病的关系提供了重要工具。 细胞凋亡是生物有机体清除某些组织细胞的一种内在、独特的细胞死亡模式，参与生物体的多种生理和病理过程。在某些心血管疾病中，心肌细胞的凋亡可能与该疾病的病理损伤有关。因硕士研究生:宋朝君导师:金伯泉教授、朱勇副教授第四军医大学硕士学位论文此，深入探讨心肌细胞凋亡的发生机制，可有助于阐明这些心血管疾病的发病机理，进而可能成为相关疾病治疗的一个靶点。应用免疫组织化学技术，我们发现凋亡诱导配体TRAIL及其受体DR4、DRS、DcRI和DcRZ在正常人心脏组织中均有表达，其中TRAIL和DR4表达量较少，而DRS、DcRI和DcRZ的表达水平较高，阳性反应产物主要分布于胞浆，胞膜上也有部分分布。这些研究结果提示，TRAIL及其受体可能会参与某些病理状态下心肌细胞的凋亡过程，为进一步研究这些分子在心肌损伤中的作用机制提供了形态学依据。