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目的: 抗β2GPI抗体可以通过诱导内皮细胞、单核细胞、血小板等细胞产生促血栓和促炎因子参与抗磷脂综合征(antiphospholipidsyndrome，APS)的病理进程和临床症状的产生。本课题组前期研究表明，β2GPI能通过活化TLR4诱导小鼠骨髓来源树突状细胞(bonemarrow-derived dendritic cells，BMDCs)成熟。但是，对β2GPI免疫后引起抗β2GPI抗体生成的机制仍有待进一步阐明。在前期研究和相关文献报道的基础上，本研究以β2GPI免疫前后小鼠血清中抗β2GPI抗体水平变化和脾脏T细胞分化相关指标的变化为切入点，对抗β2GPI抗体的产生机制和Toll样受体4(Toll-like receptor4，TLR4)在其中的作用进行探讨。 方法: (1)酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay， ELISA）检测经β2GPI免疫的Balb/c小鼠、 C3H/HeN小鼠（TLR4表达正常）、C3H/HeJ小鼠（TLR4表达缺陷）和生理盐水处理的Balb/c小鼠血清中的抗β2GPI抗体水平。 (2)实时荧光定量PCR(Real-time quantitative PCR，RT-qPCR)检测经β2GPI免疫的Balb/c小鼠、C3H/HeN小鼠、C3H/HeJ小鼠和生理盐水处理的Balb/c小鼠脾脏细胞中GATA3、IL-4、T-bet、IFN-γ、Foxp3的mRNA水平。 (3)流式细胞术(Flow Cytometry，FCM)检测经β2GPI免疫的Balb/c小鼠、C3H/HeN小鼠、C3H/HeJ小鼠和生理盐水处理的Balb/c小鼠脾脏细胞中GATA3阳性细胞和Foxp3阳性细胞的比例。 结果: (1)在β2GPI免疫2次后，即可在Balb/c小鼠的血清中检测到高效价(1∶100，000)的抗β2GPI抗体，而在β2GPI免疫4次后，血清中抗β2GPI抗体的效价进一步升高(＞1∶100，000)。 (2)β2GPI免疫2次后，Balb/c小鼠脾脏细胞中Th2细胞相关因子GATA3和IL-4的mRNA水平较生理盐水处理的Balb/c小鼠升高(p＜0.05);β2GPI免疫4次后，小鼠脾脏细胞中IL-4的mRNA水平仍旧高于生理盐水处理的Balb/c小鼠(p＜0.05)，但GATA3、T-bet和Foxp3的mRNA较生理盐水处理的Balb/c小鼠降低(p＜0.05)。而无论经过β2GPI免疫2次还是4次，Balb/c小鼠脾脏细胞中IFN-γ的mRNA水平与生理盐水处理的Balb/c小鼠均无显著差异。 (3)β2GPI免疫2次后，Balb/c小鼠脾脏淋巴细胞中GATA3阳性细胞比例高于生理盐水处理的Balb/c小鼠(p＜0.05)。β2GPI免疫4次后，Balb/c小鼠脾脏淋巴细胞中GATA3阳性细胞比例高于生理盐水处理的Balb/c小鼠(p＜0.05)，而Foxp3阳性细胞比例低于于生理盐水处理的Balb/c小鼠(p＜0.05)。 (4)在β2GPI免疫后，C3H/HeN小鼠相对C3H/HeJ小鼠能在血清中检测到更高水平的抗β2GPI抗体(p＜0.05)。 (5)β2GPI免疫后， C3H/HeN小鼠脾脏细胞中GATA3和IL-4的mRNA水平相对C3H/HeJ小鼠升高(p＜0.05)，而T-bet、IFN-γ、Foxp3的mRNA水平相对C3H/HeJ小鼠降低(p＜0.05)。 (6)β2GPI免疫后，C3H/HeN小鼠脾脏淋巴细胞中GATA3阳性细胞比例高于C3H/HeJ小鼠(p＜0.05)，而Foxp3阳性细胞比例低于C3H/HeJ小鼠(p＜0.05)。 结论: (1)β2GPI免疫小鼠能诱导高效价抗β2GPI抗体生成和Th2型免疫应答的活化，且免疫应答强度和免疫次数有关。 (2)β2GPI免疫后，C3H/HeN小鼠相对C3H/HeJ小鼠在血清中存在更高水平的抗β2GPI抗体，且在mRNA水平和细胞水平均能检测到更强的Th2型免疫应答活化，同时伴有Th1型免疫应答和Treg免疫抑制功能的下调。提示TLR4在β2GPI诱导的Th2型免疫应答和抗β2GPI抗体的生成中发挥作用。 (3)抑制TLR4的表达或功能可能有利降低APS患者的抗β2GPI抗体水平，进而对APS血栓形成等临床症状起到防治作用。