无关供者外周血干细胞免疫细胞组分与移植物抗宿主病及免疫重建的关系

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目的1.探讨无关供者移植物中免疫细胞组分与GVHD的关系;2.探讨移植物中免疫细胞组分与移植后免疫细胞重建的关系;3.探讨移植后GVHD发生与免疫细胞重建的关系。方法回顾性分析2013年7月至2018年6月于我院行无关供者PBSCT的73例血液病患者的临床资料,通过流式细胞术检测移植物中单个核细胞(MNC)、CD34+细胞、CD3+T淋巴细胞、CD4+细胞、CD8+细胞、NK细胞、NKT细胞、Treg细胞的数量,于移植后1月、3月、6月、12月检测患者外周血中CD3+、CD4+、CD8+、Treg、NK细胞所占淋巴细胞百分比。根据中位数,将移植物中细胞组分的数值分为较高数量组和较低数量组。根据西雅图GVHD分类法,将发生GVHD的患者分为aGVHD组、Ⅱ-Ⅳ度aGVHD组、Ⅲ-Ⅳ度aGVHD组,cGVHD组、局限性cGVHD组以及广泛性cGVHD组。采用SPSS 24.0软件进行统计学分析,生存分析采用Kaplan-Meier法和Log-rank检验,采用Cox回归分析进行多因素分析,移植物细胞组分与免疫重建的关系采用相关分析。结果1.所有患者均获造血重建,中性粒细胞及血小板的中位植入时间分别为12d(9~20d)、13d(9~43d)。CD34+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞数与粒细胞重建时间呈负相关(r值分别为-0.23、-0.281、-0.256,P值分别为0.05、0.016、0.029),而移植物中各细胞组分与血小板重建时间无相关性。2.截止至2019年9月30日,27例(37%)患者死亡,46例(63%)患者存活,移植后3年OS率为63.4%±5.8%。6例(8.2%)患者复发,移植后3年DFS率为89.6%±4.1%。统计分析提示移植物中较高数量组CD34+细胞可提高移植后OS率(75.7%±7.1%VS 43.9%±9.7%,P=0.041),其余移植物细胞组分的数量与移植后OS率和DFS率均无影响(P均>0.05)。3.单因素分析结果显示:患者年龄越大、血型不合、HLA配型不全合、较高数量CD3+T细胞、较低数量Treg细胞组患者移植后Ⅱ-Ⅳ度aGVHD发生率较高(P均<0.05);移植物中较高数量CD34+细胞组患者移植后aGVHD发生率较低(51.4%±8.2%VS 77.8%±6.9%,P=0.023);成年女性供者组患者 Ⅲ-Ⅳ 度aGVHD的发生率较高(P=0.042);较高数量Treg细胞组患者移植后Ⅲ-Ⅳ度aGVHD 和 cGVHD 发生率均较低(P=0.011,P=0.003)。多因素分析结果示:患者年龄越大(OR=0.364,95%CI=0.133~0.996,P=0.049)、供受者 HLA 配型不全合(OR=3.162,95%CI=1.220~8.196,P=0.018)、较高数量 CD3+T 细胞(OR=0.191,95%CI=0.067~0.541,P=0.002)、较低数量 Treg 细胞(OR=3.151,95%CI=1.222~8.122,P=0.018)是移植后Ⅱ-Ⅳ度aGVHD发生的独立危险因素。4.移植后前100天,Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的发生与NK细胞(r=-0.451,P<0.01)、CD4+细胞(r=-0.550,P<0.01)、CD8+细胞(r=-0.501,P<0.01)的重建呈负相关。结论1.在无关供者PBSCT中,移植物中高数量的CD34+细胞移植后aGVHD发生率低,且可提高OS率;2.移植物中高数量CD3+细胞、低数量Treg细胞、患者年龄越大、供受者HLA配型不全合是Ⅱ-Ⅳ度aGVHD发生的独立危险因素;3.移植物中高数量的Treg细胞对移植后降低急慢性GVHD发生有益;4.移植后CD4+细胞、CD8+细胞、NK细胞的重建与Ⅱ-Ⅳ度aGVHD的发生有关。
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