近些年,随着养殖业的逐步发展,各省的养殖场数量都在增加,包含很多小型的或农牧民自家的小型养牛场,这类养牛场多数存在着一些卫生和防疫方面的欠缺,在养牛的同时还养犬、猫等动物,容易导致传染病和寄生虫病的传播。新孢子虫病是养殖业中常见的寄生虫病,它普遍存在于全世界各个地区,对家畜的健康构成威胁,对养殖业造成很大的经济损失。新孢子虫(Neospora caninum)是一种分布范围很广的动物胞内原生寄生虫,可感染鹿、马、牛、羊等多种牲畜,犬和其他的犬科动物是其终末宿主。新孢子虫病会导致流产、死胎、或新生犊牛神经系统疾病。在牛的养殖中,母牛流产会造成很大的经济损失,会抬高养殖成本,降低牛的产出率,应引起更高的重视。本研究首先建立了 一种以NcSAGl和NcGRA7两种蛋白的混合物作为包被抗原的间接ELISA检测方法,用于检测血清中的新孢子虫抗体。经过特异性试验、重复性试验,然后对采自吉林省10个地区的258份黄牛血清和采自吉林省内5个不同地区的76份奶牛血清进行了新孢子虫病现地血清样本的检测。并将现地血清样本的检测结果与商品化试剂盒检测结果和以及NcSAG1 ELISA检测结果进行对比,结果表明该方法与商品化试剂盒检测结果的符合率达到90.12%、与NcSAG1 ELISA检测结果的符合率达到94.91%。本试验建立的新孢子虫检测ELISA方法对新孢子虫病的诊断和预防提供参考。将本试验建立的检测方法检测现地血清的结果进行分析,对比了不同地区、不同年龄段、不同季节、不同性别、不同种群的血清中新孢子虫抗体阳性率,结果显示不同地区、不同年龄段、不同季节、不同性别的奶牛和黄牛血清中新孢子虫抗体阳性率差异均不显著。该流行病学调查结果为我国新孢子虫病流行情况提供了一定数据。