靶向调节CHI3L1表达对乳腺癌生物学行为影响的机制研究

来源 :大连医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:mikewu
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
背景:CHI3L1又称几丁质酶3-样蛋白1,最初在MG63细胞系的培养上清液中被发现,属于几丁质酶样蛋白(CLPs)成员之一。人的CLPs主要由巨噬细胞、癌细胞、软骨细胞、滑膜细胞、中性粒细胞等分泌,CHI3L1的高表达水平与乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、肝癌、肺癌、结肠癌等癌症的不良预后相关。目前有研究表明CHI3L1与乳腺癌的不良预后有关,但具体关系及其机制尚不清楚,本研究通过探究CHI3L1与乳腺癌细胞之间的生物学行为之间的关系,为乳腺癌的治疗提供基础性理论研究支持。方法:1.慢病毒构建乳腺癌细胞CHI3L1体外表达体系。利用RNA干扰序列设计原则,对CHI3L1基因序列设计干扰靶点,合成引物后构建RNAi载体,筛选出稳定表达的细胞系;对5种乳腺癌细胞株进行慢病毒转染(MDA-MB-468,MDA-MB-453,MCF-7,MDA-MB-231 and MDA-MB-436),利用荧光实时定量聚合酶链式反应(RT-PCR)测定CHI3L1基因干扰效率。2.CCK8检测0-96小时,各实验组乳腺癌细胞的增殖的情况,流式细胞仪检测乳腺癌细胞凋亡情况和细胞周期情况。3.Transwell实验观察,不同CHI3L1表达水平的乳腺癌细胞转移能力和侵袭能力。4.Western blot检测CHI3L1干扰后乳腺癌凋亡蛋白Bax和Bcl-2、细胞周期蛋白Cyclin D1、MMP9蛋白的表达情况。结果:1.RT-PCR和western blot结果显示在五株乳腺癌细胞中慢病毒载体干扰sh RNA-CHI3L1表达水平均有效降低,MCF-7和MDA-MB-231乳腺癌细胞的干扰效率最高。2.CCK8结果显示,下调CHI3L1的表达水平,乳腺癌细胞的增殖水平下降。下调CHI3L1的表达水平促进乳腺癌细胞的凋亡率上升。细胞周期结果显示,下调CHI3L1的表达水平,可以使乳腺癌细胞在G1期阻滞,G1期细胞数量增加,G2/M期的细胞数量减少。3.Transwell结果显明,CHI3L1的表达水平降低后,乳腺癌细胞侵袭能力和转移能力降低。4.下调CHI3L1表达后,乳腺癌细胞的Cyclin D1的表达明显降低,凋亡蛋白Bax的表达水平增高,Bcl-2表达降低,调控转移的MMP-9蛋白表达水平下降。结论:通过试验分析,我们首先构建并验证了CHI3L1低表达慢病毒载体以及CHI3L1低表达MCF-7乳腺癌细胞株,分别从细胞凋亡、细胞周期、癌细胞迁徙和侵袭证明了CHI3L1对乳腺癌细胞生物学功能上的影响,CHI3L1可以促进乳腺癌细胞增殖、迁徙和侵袭。这预示着CHI3L1可作为乳腺癌发生发展的肿瘤标记物,为临床通过血清或血浆检测用于乳腺癌的诊断提供一定的依据。
其他文献
<正>小学教学过程中组织综合实践教学活动,对于培养学生的学习能力、实践能力、创新能力具有重要意义。然而,传统的实践活动实施方式无法体现活动育人的价值,活动的教学成效不符合预期。项目教学法是一种汇集多种教育思想、多项教学资源的教学方法,运用项目教学法组织综合实践活动,能够大幅提高活动质量。文章立足小学教学实践,从项目化教学的角度提出几点组织综合实践活动的建议,供参考。
期刊
我国于2020年9月,提出了“双碳”减排目标,装配式建筑的发展势在必行,但是目前我国装配式建筑发展仍处在初步阶段,这是因为装配式产业链不完善,发展不平衡。在全面实行双碳战略过程中,装配式建筑产业逐渐形成链条结构,为促进产业链壮大发展,理应明晰形成方向。笔者简要分析了装配式建筑产业链的发展特点与组成结构,重点阐述产业链形成机制与实践路径,经由优选合作伙伴、提升组织协作力、强化产业引导力等举措,推动装
期刊
目的:应用增强T2*加权血管成像(ESWAN)技术,探讨其定量参数R2*和T2*值在鉴别子宫透明样变性平滑肌瘤与非变性平滑肌瘤中的价值。材料和方法:回顾性分析2010年01月至2021年10月间经我院手术病理证实的101例子宫肌瘤患者的临床及影像学资料。根据病理结果分为透明样变性子宫肌瘤组38例和非变性子宫肌瘤组63例。所有患者术前均行1.5TMRI检查,扫描序列包括常规T1WI、T2WI脂肪抑制
学位
装配式建筑产业链的高质量发展对我国建筑工业化转型升级有着重要意义。本文在比较装配式建筑产业链与传统建筑产业链差异性的基础上,分析装配式建筑产业链高质量发展的内涵,揭示现阶段我国装配式建筑产业链存在创新驱动力不足、各环节协同性差以及标准化水平低等问题;对此,可通过促进装配式建筑产业链与创新链深度融合、建设产业链全过程信息一体化平台、健全产业链标准化发展体系等手段,推动我国装配式建筑产业链的高质量发展
期刊
原发性干燥综合征(Primary Sj(?)gren’s syndrome,p SS)是一种常见的慢性炎症性自身免疫性疾病,其特征是淋巴细胞浸润导致外分泌功能减退甚至丧失。但是其发病机制尚不清楚,亟需解决。肠道菌群作为重要的环境因素是很多自身免疫病的启动因子并且在疾病的发展过程中扮演重要角色。研究提示,肠道菌群失调可能在p SS的发生发展中发挥关键作用,但具体的菌群变化和与免疫学指标的相关性报道较
学位
第一部分背景:腹腔镜胆囊切除术是普外科最常见的手术,胆囊切除术后综合征(post cholecystectomy syndrome,PCS)作为其术后高发的并发症,因其病因复杂,给诊疗带来了一定的困难。狭义的胆囊切除术后综合征指排除相关器质性疾病后,而其临床症状仍然存在者。目前针对狭义PCS,西医治疗主要以对症治疗为主,但是中远期疗效欠佳,易反复。芍药甘草汤(Shaoyao Gancao Deco
学位
目的:本研究旨在探讨高敏肌钙蛋白(hs-c Tn I)、N末端前体脑利钠肽(NT-pro BNP)与心房颤动(房颤)合并缺血性脑卒中的相关性及CHA2D-VASc BC评分对于房颤患者首次发生缺血性脑卒中的预测价值。方法:此研究为回顾性研究。收集尼日尔的尼亚美国立医院和尼亚美转诊医院2019年1月至2021年1月临床资料完整的房颤患者252例,根据是否合并缺血性脑卒中分为卒中组108例和非卒中组1
学位
传统建筑生产方式早已不能适应建筑业高质量的发展要求,伴随着新一轮信息科技革命的到来,建筑行业和新兴的信息科技之间的关系越来越密切,其本身的范畴也在扩大,它与其他行业系统形成众多交叉学科,新型建筑工业化产业链便是交叉领域的产物。我国已经高度重视新型建筑工业化的变革性影响,将新型建筑工业化作为推动建筑业进一步转型升级的重要抓手,因此推动其发展显得尤为迫切和重要。但在实际的新型建筑工业化产业链发展过程中
学位
目的:急性胰腺炎(acute pancreatitis,AP)属于腹部急症外科最常见的病症之一,大连医科大学附属第一医院在清胰汤的基础上进行了制剂的改良,由此制成的颗粒剂——“清胰颗粒”是目前临床上治疗AP的有效验方,地塞米松在AP中发挥的抗炎作用能有效地阻止全身炎症反应综合征(systemic inflammatory response syndrome,SIRS)的进程。本研究通过对我院AP患
学位
为进一步推动我国装配式建筑全产业链的高质量发展,收集山东省17个地市的集成应用类与部品生产类装配式建筑产业基地指标数据,选取集成应用类基地10个计算指标与部品生产类基地15个计算指标,构建使用SoftMax函数作为输出层激活函数的BP神经网络计算模型,分析了产业基地对装配式建筑全产业链构建的整体支持度,并利用SPSS软件进行检验。结果表明:山东省集成应用类与部品生产类产业基地对全产业链支撑程度较高
期刊