论文部分内容阅读
目的：骨性关节炎(OA)是一种退行性骨关节病变，最易发生在膝关节。随着年龄的增加骨性关节炎患病率直线上升。骨性关节炎造成的疼痛和功能障碍严重影响着患者的生活和工作，给家庭和社会带来巨大的压力。目前对骨性关节炎的治疗主要是缓解疼痛，改善功能，降低致残率。防治方法包括：降低体重、功能锻炼，使用镇痛药物，关节腔内注射糖皮质激素和玻璃酸钠，口服硫酸葡萄胺，关节镜清理冲洗，关节置换等。口服非甾体消炎镇痛药仍是比较普遍的采取的治疗措施，对缓解疼痛是有益的，但并不能抑制关节软骨的病理变化的进程。而临床上常用的关节腔内注射糖皮质激素疗法，虽然可短时间改善症状，但长期注射可造成关节软骨的灶性溶解、坏死等，进一步加速了关节软骨的退变。目前除了关节腔内注射玻璃酸钠和口服硫酸葡萄胺有益于关节软骨的改善之外，还没有比较理想的保守治疗方法。光照射治疗用于关节炎的治疗已有数十年的历史，我们引进日本东京医研株式会社生产的超激光疼痛治疗仪，以直线偏光近红外线对关节和软组织进行照射治疗，取得了明显的疗效，但其对关节软骨和关节滑膜的病理改变还没有详细的报道。本实验的目的在于研究超激光疼痛治疗仪照射治疗关节炎对关节滑膜和软骨的病理影响，进而来客观的评价超激光疼痛治疗仪对骨性关节炎的临床治疗作用，以期寻求一种安全、无副作用，疗效确切的治疗骨性关节炎的新方法。
方法：选择成年日本大耳白兔54只，雌雄各半，体重2.5±0.5kg，兔龄3.0±0.5月，随机分为A、B、C、D、E、F、G、H、I共9组，每组6只。其中A、B、C、D、E、F、G组均进行膝关节模型的制作。模型制作方法：随机选择一侧膝关节，采用乌拉坦进行全身麻醉，并辅助0.5％的利多卡浸润阻滞麻醉，采用纵行切口依次切开膝关节内侧的皮肤、膝关节内侧副韧带和关节囊，用纤维剪刀伸入关节腔内切断膝关节内外交叉韧带，并切除膝关节内侧半月板，然后进行膝关节的抽屉试验加以验证前后交叉韧带是否完全离断。之后逐层缝合切断的膝关节囊、肌肉和皮肤。手术结束，待兔完全清醒后送回动物饲养室，每日每只肌注青霉素40万单位，连用5天。A、B、C、D组术后1周开始超激光照射治疗，F、G、H、I组术后一周开始假照射治疗。A组每日照射治疗5分钟，B组每日照射10分钟，连续照射3周，用于观察不同照射时间对关节炎的预防作用；C组照射5分钟，每天一次，D组照射10分钟，每天一次，两组连续照射7周用于观察不同的照射时间在关节炎形成的过程中对关节的防治作用；E组在模型制作手术完成后4周，即膝关节炎模型形成后开始照射，每天10分钟，连续照射3周，用于观察在关节炎模型形成后超激光照射对关节的治疗作用。F组在模型制作手术后1周进行假照射3周，作为A、B两组的模型对照组；G组在模型制作手术后1周进行假照射治疗7周，作为C、D、E三组的模型对照组。H、I两组为空白对照组，其中H组在正常饲养1周后进行假照射治疗3周，作为A、B两组的空白对照组；I组在正常饲养1周后进行假照射治疗7周，作为C、D、E三组的空白对照组。
照射方法：采用B型探头照射，输出功率为2200mM，能量采用80％。由助手将兔仰卧位固定于治疗床上，治疗者采用手持法将探头放在手术关节的髌前韧带的内侧，即相当于股骨端与胫骨端相对处，将探头置于其上，并稍斜向内，使照射探头发射的光束照射到整个关节腔内。模型对照组和空白对照组进行假照射治疗。
标本处理：疗程结束后采用静脉空气注射法处死所有实验用兔，切开关节腔，切取胫骨平台上的关节软骨和膝关节前正中部分的滑膜组织，并将软骨组织一部分10％福尔马林液固定，留做普通光镜的病理观察。选取胫骨平台上的外1/3处切取2×2mm大小的软骨组织放入3％的戊二醛溶液中并在4℃冰箱中至少固定4小时以上，留做透射电镜的观察。
光镜观察：对切取的关节软骨和滑膜，HE染色后，每张切片选择6个不同部位进行光镜(×200)病理观察，并参照C.Colombo的关节软骨病理积分标准进行病理评分。
电镜观察：每组中分别取两模型的关节软骨进行透射电镜的病理观察。
统计处理：对所有数据进行统计学分析。所有数据用均数±标准差表示。采用SPSS10.0统计软件，P＜0.05认为差异显著，P＜0.01认为差异非常显著。
结果：术后4周时模型组中照射治疗组和未照射治疗组的关节软骨仍显光泽，略发黄，软骨触之较硬关节液量增多，关节液呈黄色，无明显的关节软骨表面的裂纹、糜烂和溃疡的形成，两组表现基本一致。术后8周模型组中关节的病理改变进一步加重，关节软骨失去原有的光泽，呈灰黄色，未治疗组较治疗组明显为重，软骨表面变得粗糙，并有裂纹、糜烂和溃疡形成，软骨层变薄，部分露出骨面。
光镜观察：术后4周A、B两组关节软骨表面脆裂，基质未见到明显的溃疡面，软骨细胞稍减少，排列尚整齐，细胞成簇存在。F组的关节软骨表面脆裂明显，基质可见到部分溃疡，软骨细胞减少，排列不规则，细胞成簇存在。A组和B组病理变化总积分明显低于F组(p＜0.05)，但A、B两组比较无差别(p＞0.05)。术后8周：C组、D组两组软骨表面脆裂明显，并出现糜烂和溃疡，偶见边缘骨赘形成，软骨细胞数目减少，排列紊乱，细胞成簇增加。G组软骨表面出现明显的裂纹，中等表层缺损，可见到小骨赘和溃疡面的形成及轻度软骨下骨裸露，软骨细胞中度减少，排列无规则，细胞成簇明显。C、E组关节软骨病理积分均明显低于G组(p＜0.05)，D组关节软骨病理积分明显低于G组(p＜0.01)，且D组关节软骨病理积分低于C组，但无统计学差异。C组和E组的软骨细胞成簇积分和细胞丢失积分低于G组(p＜0.05)，D组软骨细胞成簇积分和细胞丢失积分非常显著低于G组(p＜0.01)。
电镜观察：I组(正常关节软骨)：软骨细胞肥胖，细胞器丰富，可见少量糖元及脂滴。表层下方未见纤维母细胞样细胞，间质有大量胶原纤维交错排列(见图11)；A组表层下方未见纤维样母细胞，间质大量胶原纤维散乱排列，软骨细胞较肥胖，细胞器丰富，细胞周围常可见较细碎的胶原纤维呈环状排列(见图13)；B组表层下方未见纤维样母细胞，间质大量胶原纤维散乱排列，软骨细胞增生明显，细胞器丰富(见图12)；C组软骨细胞增生活跃，细胞器丰富，组织内可见较多的纤维母细胞样细胞，间质有大量胶原纤维编织状排列(见图15)；D组软骨细胞较肥厚，糖元较丰富，少数细胞内可见脂滴。F组软骨细胞较多，体积较小，细胞器丰富(见图16)；G组软骨细胞稀疏，少数细胞内可见脂滴，部分软骨细胞发生变性(见图17)。电镜观察结果表明，超激光照射治疗可延缓软骨细胞的破坏，促进软骨细胞和纤维母细胞的增生，对骨性关节炎具有积极的预防和治疗作用。
结论：超激光照射治疗骨性关节炎可明显的促进关节周围软组织的修复，减缓关节软骨的破坏，改善关节功能的作用。对骨性关节炎具有一定的预防和治疗作用，且适当的延长照射时间和疗程会明显提高疗效。实验证明超激光照射具有效果显著、无任何毒副作用等优点，是治疗骨性关节炎的一种非常有效的方法。