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前言 多药耐药（multidrug resistance，MDR）是导致急性白血病化疗失败的主要原因。引起MDR的机制有多种，较为重要的一种是多药耐药相关蛋白（MDR-associated protein，MRP）的过度表达，其中涉及多药耐药相关蛋白1（MRP1）和肺耐药相关蛋白（lung resistance associated protein，LRP）。 MRP1是一种跨膜磷蛋白，在谷胱甘肽（GSH）和ATP的参与下可将柔红霉素、长春新碱及VP-16等从细胞内转运到细胞外而导致耐药。LRP是人类的穹隆体主蛋白，其主要定位于胞浆和胞核，介导核浆之间的双向物质转运，可将细胞内的药物如蒽环类抗生素、长春花属生物碱及铂类等泵出细胞外，使作用位点的药物浓度降低以致耐药。本实验采用免疫细胞化学S-P方法检测52例急性白血病患者MRP1和LRP的表达，进一步探讨白血病多药耐药和预后的关系。 实验方法 一、临床资料：急性白血病52例（FAB标准），男23例，女29例，中位年龄37.1±13.8岁。包括急性非淋巴细胞性白血病42例，其中M15例，M28例，M36例，M45例，M513例，M61例，MDS-AML4例；急性淋巴细胞白血病10例，其中L12例，L28例。以7名健康志愿者及5名非血液病患者的骨髓作为正常对照，男8例，女4例，中位年龄35.8±13.2岁。 二、单个核细胞的分离：取肝素抗凝外周血或骨髓3-5ml，用Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞。 三、白血病患者MRP 1表达的检测：应用免疫细胞化学S-P法检测MRP1的表达，阳性细胞≥15％判定为MRP1表达阳性。 四、白血病患者LRP表达的检测：应用免疫细胞化学S-P法检测LRP的表达，阳性细胞≥15％判定为LRP表达阳性。 五、统计学处理：采用SPSS6.2统计软件，进行χ2检验，线性相关分析。实验结果 一、正常人和急性白血病患者MRPI及LRP的表达 52例急性白血病患者中MRPI表达阳性巧例（28 .8%）;LRP表达阳性22例（42.3%）。12例正常对照者骨髓中均未检测到MRPI表达，仅1例LRP表达阳性。MRPI及LRP共表达9例（17 .3%），两者均不表达者24例（46 .2%）。 二、MRPI及LRp表达和预后的关系 15例MRPI阳性表达者完全缓解（eomPletere而ssion，CR）5例，CR率为33.3%;37例阴性表达者CR22例，CR率59.5%，两组差异不显著（P>0.05）。22例LRP阳性表达者CR7例，CR率31.8%;30例阴性表达者CR22例，CR率73.3%，两组间差异显著（P<0.05）。MRPI及LRP共表达者CRZ例，CR率22.2%;两者均不表达者CR18例，CR率75%，两组间有十分显著差异（P<0.01）。 三、MRPI和LRP的关系 52例急性白血病患者同时检测了MRPI及LRP表达，巧例MRPI阳性表达患者中9例LRP表达阳性，37例MRPI阴性表达者中12例LRP阳性。相关分析表明，MRPI阳性表达与LRP阳性表达的Pealson相关系数为0.254（P>0 .05）。讨论 MRPI是由位于染色体16P13.1的MRP基因编码的相对分子量为190kd的N端糖基化膜磷蛋白，属于ATp结合超家族成员。其主要作用机制是将进人细胞内的药物泵出或通过改变细胞内药物的分布，致作用位点的药物浓度降低，以致耐药。肠而发现，MRPI表达与急性白血病FAB分型有关，M4和MS的M即1 mRNA水平明显低于其他FAB亚型;玩ith等报道M即1表达随年龄增长而下降，我们在实验中也观察到MRPI的表达存在上述特点。MRPI与急性白血病预后的关系一直存在争议，有学者认为，MRPI与预后密切相关，但也有证据表明，MRPI表达与CR率无关，但也有实验显示M即1表达阳性患者对药物的反应性降低。我们的研究结果显示急性白血病MRPI表达阳性者CR率虽低于表达阴性者，但两者差异无显著性，提示MRPI不是影响急性白血病预后的独立因素，不足以作为判定预后的可靠指标。 LRP基因位于16pl3.2靠近MRP基因的位置。LRp是人类的弯窿体主蛋白，作为核孔复合物介导细胞核与细胞浆之间的双向物质转运。玩ith等发现LRP表达与患者的年龄、外周血白细胞计数有关，FAB分型中M4和MS两个亚型的LRp表达频率较高。我们也在实验中观察到外周血白细胞计数)20 x 109/L者LRp表达增加，而各个亚型之间的表达无明显差异，可能与实验方法、地域、人种差异有关。本研究中LRP阳性表达患者的CR率（31.8%）显著低于阴性表达患者（73.3%），证实LRP在急性白血病患者中的过度表达与CR率密切相关，这一结果提示LRP可能是影响急性白血病预后的重要危险因素。进一步研究发现，MRPI/LRP共表达患者临床CR率低，预后不良，较单独表达 LRP与临床疗效具有更高的相关性，这表明临床耐药性的产生不是由单一一种耐药蛋白引起，而往往是两种或两种以上的蛋白共同表达起作用。因此，联合检测多种多药耐药蛋白将提高临床耐药性和预后预测的特异性和敏感性。 关于MRPI与LRP表达的相关性，目前报道尚不多见。本研究结果表明:MRPI与LRP的表达无明显相关。提示MRPI与LRP介导的是两种不同的耐药机制，两者无相关关系。结合两种耐药机制，对急性白血病预后的判断有重要价值。结论 1.急性白血病患者MRPI、LRP表达增加。 2.MRPI表达与急性白血病预后未见相关。