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目的:瑞舒伐他汀(Rosuvastatin)是一种具有高度选择性的3-羟-3-甲戊二酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶抑制剂。本课题旨在建立健康人血浆中瑞舒伐他汀钙的液相色谱-质谱(LC-MS/MS)测定方法,并进行瑞舒伐他汀钙片在中国健康受试者体内的药代动力学和生物等效性研究。方法:以阿斯利康制药有限公司生产的瑞舒伐他汀钙片(可定)做参比制剂,采用两制剂双周期交叉试验设计,研究国产瑞舒伐他汀钙片的生物等效性。19例健康男性受试者随机交叉空腹口服单剂量瑞舒伐他汀受试制剂或参比制剂10 mg,于给药前和给药后0-72 h按设计的时间点采集血样。血浆样品中加入瑞舒伐他汀-d6钠为内标,用甲基叔丁基醚为萃取溶剂进行液-液萃取,处理后的样品用Capcell PAK MG C18分析柱(50×4.6 mm I.D.,5μm),加C18保护柱(4×3.0 mm I.D.,5μm)进行分离,以甲醇-乙腈-水-甲酸(55:5:40:1,v/v/v/v)为流动相,采用串联四级杆质谱,在电喷雾电离(ESI)源正离子模式下进行选择反应监测(SRM),用于定量分析的离子反应分别为m/z 482→m/z 258.3(瑞舒伐他汀)和m/z488→m/z 264.4(瑞舒伐他汀-d6)。分析方法经选择性、线性范围、最低定量限、精密度、准确度、基质效应、稳定性等充分考察验证符合相关要求后用于样品测定。所得血药浓度数据用DAS 2.1.1软件进行统计学分析,受试制剂和参比制剂的Tmax用Wilcoxon非参数秩和检验进行统计学处理,其余主要药动学参数经对数转换后进行方差分析,用双向单侧t-检验和[1-2α]置信区间法进行生物等效性评价。结果:瑞舒伐他汀的血浆浓度在0.100-50.00 ng·ml-1范围内线性关系良好,定量下限为0.100 ng·ml-1,典型回归方程为:Y=0.796626C+0.722503(r2=0.9955,n=8)。低、中、高三个浓度水平质控样品(瑞舒伐他汀血浆浓度分别为0.200,2.00和40.0 ng·ml-1)的日内RSD分别为15.0%、4.1%和6.0%,日间RSD分别为19.0%、12.8%和12.2%,准确度分别为100.2%、99.7%和104.2%,提取回收率分别为(86.2±11.5)%、(94.4%±13.1)%和(85.2±10.9)%,内标的提取回收率为(92.8±12.1)%。瑞舒伐他汀低、高浓度的基质效应分别为112.5%和106.9%;两浓度水平下内标的基质效应分别为110.4%和109.2%,相对标准差均小于5.5%。瑞舒伐他汀血浆样品室温放置6 h、经历三次冻-融循环、-70℃放置35天均稳定;处理后样品置自动进样器内放置24 h稳定。19名健康男性受试者按两制剂双周期交叉试验设计口服瑞舒伐他汀钙参比制剂或受试制剂10 mg后,瑞舒伐他汀钙参比制剂和受试制剂的主要药动学参数Cmax分别为(16.96±8.56)ng·ml-1和(17.57±10.02)ng·ml-1;Tmax分别为(3.6±1.3)h和(3.9±1.7)h;AUC0-t分别为(153.94±74.70)ng·ml-1·h和(161.16±86.53)ng·ml-1·h;AUC0-∞分别为(156.07±75.17)ng·ml-1·h和(164.15±88.44)ng·ml-1·h;t1/2分别为(8.1±2.8)h和(9.1±4.3)h。Tmax经非参数秩和检验,受试制剂与参比制剂差异无统计学意义(P>0.05);Cmax、AUC0-t、AUC0-∞经对数转换后做方差分析,受试制剂与参比制剂差异均无统计学意义(P>0.05)。双向单侧t检验结果表明,瑞舒伐他汀受试制剂与参比制剂AUC0-t几何均值比的90%置信区间为(94.9~114.6)%,在(80~125)%范围内;Cmax几何均值比的90%置信区间为(91.7~115.1)%,在(75~133)%范围内;以AUC0-t计算,受试制剂相对于参比制剂的生物利用度为(108.0±28.8)%。19名健康受试者口服单剂量受试和参比制剂后Cmax、AUC0-t、AUC0-∞经对数转换后进行群体等效性分析,PBE分析结论均合格。结论:本文建立的血浆中瑞舒伐他汀的LC-MS/MS定量分析方法专属性好,灵敏度高,精密准确,稳定可靠,适用于瑞舒伐他汀钙片在健康人体中的药代动力学和生物等效性的研究。本研究所得瑞舒伐他汀钙片的药动学参数与国内文献报道的数据相比较,Cmax升高,t1/2明显缩短,Tmax、AUC0-t基本一致。参数的差异可能与受试者的个体差异大有关,提示临床用药应个体化给药。与国外以健康白种人为受试者的文献报道结果相比较,AUC0-t、Cmax值约为白种人的4倍,Tmax、t1/2值与白种人数据接近,说明瑞舒伐他汀药动学行为存在种族差异,给予相同的剂量,中国人较白种人有更高的血药浓度。根据生物等效性判断标准,本研究测定的瑞舒伐他汀钙片受试制剂与原研参比制剂具有生物等效性。