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目的: 1通过对邯郸市2009~2011年手足口病(HFMD)的流行病学特征的分析,明确HFMD的流行规律,为HFMD的预防控制措施和策略的制定提供科学依据。 2明确邯郸市2009~2011年EV71流行株的基因型别及其与其他地区EV71流行株的关系,探索其基因型的遗传变异情况。 方法: 1通过中国疾病监测信息系统,收集2009~2011年邯郸市报告的HFMD病例信息,通过SPSS13.0分析比较三年中HFMD病例的三间分布。 2采集HFMD病例的临床标本,针对肠道病毒(EV)5’端非编码区保守基因序列以及EV71 VP1区基因序列设计EV通用引物、EV71型和CoxA16型特异引物,进行荧光定量PCR检测。 3将检测为EV71阳性的HFMD实验室诊断病例标本分年度按采集时间编号,随机抽取接种RD细胞进行病毒分离培养。 4设计并合成针对EV71型VP1基因片段的引物,对经检测EV71核酸阳性的培养物进行RT-PCR扩增,并测定其序列,用DNASTAR软件进行核苷酸和氨基酸序列同源性分析,构建系统进化树,对邯郸市2009~2011年EV71流行株基因亚型进行分析。 结果: 1流行强度。2009~2011年邯郸市HFMD发病率为218.01/10万、122.54/10万,和34.90/10万呈连续下降趋势。 2时间分布。2009年HFMD疫情发生时间早且上升快,来势猛,下降快,无拖尾;2010年HFMD疫情上升比2009年延后两周,疫情上升趋势缓慢,达高峰后,与2009年流行曲线重合略低,下降缓慢,32周后高于2009年同期水平,有明显的拖尾现象;2011年有两个发病高峰,一个在春末夏初,与前两年高峰基本一致,另一个出现在冬季,有冬季小高峰或翘尾现象。 3地区分布 2009~2011年邯郸市19个县市、区)均有病例报告,但发病率区域间差异很大,且高发和低发县区相对固定。三年中发病率均较低的县区有峰峰矿区、邱县和魏县,发病率均较高的是邯山区、邯郸县和曲周县。 4人群分布 2009~2011年邯郸市HFMD男女性别比例在1.6%~1.73之间,男性病例多于女性病例(P<0.05);发病主要集中于0~3岁儿童,占所有发病数的86.06%,从2009年到2011年邯郸市HFMD0~3岁儿童比例依次为:83.62%,88.62%和92.07%,高发年龄有向小年龄组集中的趋势;散居儿童发病构成呈上升趋势,而幼托儿童和学生呈下降趋势。 5病原学检测结果2009~2011年共检测1267例HFMD标本,阳性896例,阳性率为70.72%。阳性标本中,EV71、CoxA16和其他肠道病毒的构成分别为65.51%、15.63%和18.86%。EV71、CoxA16和其它肠道病毒在各年的构成比例不一致(X2=106.063,P<0.001),但均以EV71为主。 6 EV71的VP1区基因特征分析邯郸市13株EV71代表株之间VP1区核苷酸同源性在96.4%~100%之间,与台湾分离株VP1区同源性为92.4%~93.2%,与2008年阜阳、2009年河南、2010年河北、2010年云南和2011年陕西分离的EV71代表株核苷酸同源性在96.6%~99.1%之间,与A、B基因型代表株VP1区同源性差异较大,在82.0%~82.7%与83.6%~84.5%之间。已知基因型C1、C2、C3、C4代表株的同源性分别在89.8%~90.3%、89.3%~90.O%、87.9%~88.7%和96.0%~96.9%之间。基于VP1区构建的EV71系统进化树显示,这13株邯郸市分离到的EV71毒株均为C4a亚型。 结论: 1邯郸市2008~2010年连续三年HFMD呈高流行状态,2009年为发病高峰年,2011年转入低流行状态。HFMD发病具有区域特征。 2不同年份HFMD流行曲线有所不同,2009年和2010年春夏高峰明显。2009年HFMD疫情上升迅猛,下降快,无拖尾现象;2010年疫情上升平缓,下降缓慢,有拖尾现象;2011年呈现两个发病小高峰,一个在春末夏初,一个在冬季。 3 HFMD发病男性儿童高于女性儿童,以3岁以下散居儿童为主,发病年龄近年有向低年龄集中的趋势。 4邯郸市2009~2011年HFMD的病原谱构成不同,CoxA16和EV71及其它型别致HFMD肠道病毒交替变化,但仍主要以EV71为主。 5 EV71毒株VP1基因分型及系统进化树分析表明,邯郸市2009~2011年EV71流行株为C4a亚型,与中国大陆近年流行株分离结果一致。