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研究背景与目的心力衰竭(heart failure,HF)是一种由各类心脏病导致心功能不全的临床综合征,是最严重的心脏病。近期由于人口老龄化的加重以及高血压等疾病的流行,心力衰竭的患病率也随之升高,成为目前最重要的心血管疾病。而心力衰竭最常见的病因是冠心病和高血压,在我国,冠心病导致的心力衰竭由1980年的36.8%上升至2000年的45.6%,在各种病因中居于首位。Micro RNAs(mi RNAs)是内源性高度保守的单链非编码小RNA,长度约为22个核苷酸,mi RNAs的作用机制是通过打靶其靶基因的3’非翻译区(UTR)调控靶基因的表达。近年来的研究表明,mi RNAs参与多种心血管疾病的调控,并且可以稳定存在于循环血液中,因此,mi RNAs有作为诊断心血管疾病的生物标志物的潜能。PPARδ/β是氧化物酶体增殖物激活受体(PPARs)的亚型之一,研究表明,PPARδ能够调节心肌能量代谢,还参与炎症、细胞增生和血管重塑等,这些都是引发心血管疾病的重要因素,通过生物信息学软件预测,发现mi R-29a有可能打靶PPARδ并调控其表达。由此我们猜想,与健康人相比,在冠心病慢性心力衰竭患者外周循环血内,mi R-29a表达是否出现异常,如果出现异常,又能否作为新的诊断冠心病慢性心力衰竭的生物标志物呢?实验方法(1)选择冠心病慢性心力衰竭患者和健康对照个体各30例,清晨抽取空腹肘静脉血5ml,EDTA-2K抗凝,用1.5ml EP管进行分装,每管200ul,分装后置于-80℃保存。(2)通过生物信息学软件确定课题研究的mi RNA为mi R-29a,并针对mi R-29a设计茎环反转录引物和Q-PCR引物。(3)用TRIzol LS分别提取冠心病慢性心力衰竭患者和健康对照个体血液样本的总RNA,进行反转录和Q-PCR。(4)用统计分析学软件SPSS 17.0对冠心病慢性心力衰竭患者和健康对照个体的Q-PCR结果进行统计分析。结果(1)通过生物信息学软件预测出PPARδ可能是mi R-29a的靶基因。(2)通过t检验,结果显示健康对照组与病例组外周血内mi R-29a的水平差异具有统计学差异。(3)通过单因素方差分析,结果显示健康对照组与各级病例组外周血内mi R-29a的水平差异具有统计学差异。(4)通过t检验和X2检验,结果显示健康对照组和NYHA各级病例组各组间性别、年龄差异不具有统计学差异。(5)通过多元logistic回归分析,结果显示对照组和分级病例组各组内不同年龄、性别患者外周血内mi R-29a的表达差异不具有统计学意义。(6)通过相关性分析,结果显示各组外周血内mi R-29a水平与NT-pro BNP水平显著正相关。结论与健康对照组相比,在冠心病慢性心力衰竭患者外周循环血内mi R-29a表达上升;心衰等级越高,表达上升的倍数越高;外周循环血内mi R-29a的水平与年龄、性别无关,与心衰等级相关。