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目的:肺癌是目前全球范围内死亡率最高的恶性肿瘤,由于人们生活方式的改变、现代工业化的快速发展,使得全球空气污染逐年加重,因此肺癌的发病率也呈现逐年上升趋势。近年来,肺腺癌（LUAD）已取代肺鳞状细胞癌成为最常见的肺癌组织学类型。随着肺癌医学影像诊断技术和肺癌早期筛查技术的飞速发展、以及肺癌靶向治疗的不断进步,使越来越多的肺癌患者生存获益,显著延长其生存时间。尽管如此,目前晚期非小细胞肺癌患者的5年生存率仍低于30%。因此,迫切需要寻找新的相关诊断标志物及新的治疗靶点,以提高非小细胞肺癌患者的生存率。Rho GTPase激活蛋白11A（ARHGAP11A）是Rho GTPase激活蛋白（Rho GAP）亚家族的成员,是一个不典型的Rho GTP。通常Rho GAPs在肿瘤组织中表现为下调,与恶性肿瘤的发生发展相关。但ARHGAP11A在肺癌中的作用仍存在争议。为明确ARHGAP11A在LUAD中的表达及其临床意义,拟通过生物信息学及相关基础实验进一步探索ARHGAP11A在LUAD中的表达,并验证其对LUAD细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。旨在揭示ARHGAP11A在LUAD进展中的潜在作用机制。研究方法:1.下载TCGA数据库中LUAD患者的原始基因表达谱、生存数据及临床信息。使用R软件分析TCGA数据库中LUAD组织与邻近正常组织ARHGAP11A的表达差异,并通过Oncomine数据库和LUAD切片的免疫组化（IHC）检测进行验证。应用Logistic回归分析ARHGAP11A表达与LUAD临床病理因素的相关性。采用Kaplan-Meier（KM）生存曲线和Cox比例风险模型来评估ARHGAP11A表达的预后意义。2.在临床LUAD组织标本研究方面,我们收集了中国医科大学附属第四医院肺癌术后患者的癌及癌旁石蜡标本,采用免疫组化方法检测ARHGAP11A的表达,并进一步分析其与临床病理因素、淋巴结转移及预后等相关性;在研究ARHGAP11A对LUAD生物学功能方面,我们首先采用RT-PCT及Western blot检测ARHGAP11A在LUAD细胞系及正常支气管上皮BEAS-2B细胞中的表达,并分别筛选ARHGAP11A相对高表达与低表达细胞系作进一步体外研究;选择ARHGAP11A-sh RNA抑制ARHGAP11A在A549和PC-9中的表达;通过CCK-8实验分析ARHGAP11A对细胞增殖的影响;Transwell及划痕实验探讨ARHGAP11A对细胞侵袭及迁移的影响;通过流式细胞仪分析ARHGAP11A对细胞周期及凋亡的影响;利用裸鼠皮下成瘤实验探讨ARHGAP11A对肿瘤体内生长的影响。3.在研究ARHGAP11A调控Hippo-YAP通路的潜在分子机制方面,我们首先利用RT-PCR和Western blot检测ARHGAP11A与Hippo通路关键因子YAP及p YAP的表达,以评估ARHGAP11A对Hippo-YAP的影响;ARHGAP11A敲减情况下转染YAP过表达慢病毒进行挽救实验,以明确ARHGAP11A是否通过YAP调节细胞功能。结果:1.TCGA数据库显示,LUAD组织中ARHGAP11A的表达明显高于正常组织（P＜0.001）。Oncomine数据库（P＜0.001）和IHC检测（P＜0.001）验证了LUAD中ARHGAP11A的上调。Logistic回归分析显示ARHGAP11A的高表达与年龄、性别、TNM分期、T分期、淋巴结转移密切相关。基于TCGA和KM绘图仪数据库的KM图表明,与ARHGAP11A低表达的患者相比,具有高表达ARHGAP11A的LUAD患者的总生存期（OS）较差。多因素Cox回归分析表明,ARHGAP11A的高表达可能是LUAD预后不良的重要独立预测因子[风险比（HR）=1.385;P＜0.001]。2.RT-PCR及Western blot均证实:在A549和PC-9细胞中,ARHGAP11A-sh RNA能显著抑制ARHGAP11A的表达水平。3.CCK-8实验显示,ARHGAP11A敲减后,细胞的增殖能力减弱。细胞周期及凋亡分析提示,ARHGAP11A敲减后,PC-9细胞发生S/G2/M期阻滞,并促进细胞凋亡发生。划痕实验及Transwell实验提示,ARHGAP11A敲减后,细胞侵袭及迁移能力减低。4.PC-9细胞裸鼠皮下成瘤实验证实,ARHGAP11A表达减少,可抑制肿瘤的生长。5.在研究ARHGAP11A调控Hippo-YAP通路的潜在分子机制方面,ARHGAP11A敲减后,YAP蛋白表达及m RNA表达水平均下调,ARHGAP11A与YAP表达成正相关;核浆分离实验结果显示,ARHGAP11A敲减后,细胞核内YAP蛋白表达水平下调,细胞浆中YAP蛋白表达水平无明显差别,细胞浆中p YAP表达增高,p YAP/YAP比例升高,结果表明:ARHGAP11A通过调控Hippo-YAP表达进而增强LUAD的侵袭能力。6.进一步通过挽救实验发现,过表达YAP后,细胞的增殖能力增强;细胞发生S/G2/M期阻滞,无明显变化;抑制细胞凋亡发生;促进细胞侵袭能力。这些结果表明ARHGAP11A通过影响细胞核内YAP的表达来调控细胞功能。结论:1.ARHGAP11A在肺腺癌中高表达,与肿瘤大小、淋巴结转移、肿瘤分期及患者预后相关,在LUAD的发生发展中发挥致癌作用,可作为新的独立预后因素和潜在的LUAD治疗靶点。2.ARHGAP11A在LUAD细胞中发挥促进恶性生物学行为的作用,促进裸鼠皮下移植瘤生长。3.ARHGAP11A通过在m RNA水平上调细胞核内YAP表达、促进YAP蛋白入核增加,进而促进LUAD的侵袭。