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目的:本研究基于中医学肾主骨理论的物质基础,通过观察加味六味地黄汤对肾性骨病大鼠血清钙磷代谢、i PTH水平、骨代谢标记物、以及肾骨组织中Klotho和FGF23表达的影响。探究加味六味地黄汤对慢性肾脏病矿物质和骨代谢异常的肾骨保护作用机制。为该方进一步应用提供实验依据。方法:健康雄性清洁级SD大鼠82只,按体重随机分为5组:正常组（n=10）,单纯高磷组（n=18）,模型组（n=18）,中药组（n=18）,骨化三醇组（n=18）。各组组内再随机分为8周、10周、12周3个时间点,每个时间点处死6只大鼠,正常组在实验完成时一次性处死。所有大鼠在适应性饲养1周后,正常组予普通饲料饮食,单纯高磷组喂以高磷饮食（磷含量1.03%）,并予蒸馏水（1ml/100g.d）灌胃;对模型组、中药组、骨化三醇组进行造模:三组大鼠喂以高磷联合腺嘌呤饮食（磷含量1.03%,腺嘌呤含量0.75%）,持续喂养4周,第5-6周喂以高磷饮食（磷含量1.03%）。模型组在造模完成后每日喂以高磷饮食（磷含量1.03%）,同时予蒸馏水（1ml/100g.d）灌胃;中药组在造模后给予制备好的加味六味地黄汤药液（1ml/100g.d）灌胃;骨化三醇组在造模后给予制备好的骨化三醇药液（0.2ml/200g.d）灌胃。检测各组大鼠的血肌酐（Scr）、尿素氮（Bun）、血钙（Ca）、血磷（P）、1,25（0H）2D3、骨源性碱性磷酸酶（BALP）、骨钙素（Osteocalcin）等。留取各组大鼠左肾及双侧股骨备检。肾组织行PASM和Masson染色,在光学显微镜下观察肾组织的病理学变化。测定股骨的骨密度并对骨组织行Goldner′s染色观察股骨的病理形态。Western blot法和免疫组织化学法检测肾组织和骨组织Klotho、FGF23蛋白的表达。结果:1.病理结果显示:（1）肾组织病理:正常组和单纯高磷组大鼠肾组织未见明显异常;模型组大鼠肾小球基膜明显增厚、系膜增宽,肾小管损伤（萎缩或扩张）,肾间质可见炎症细胞浸润及大量纤维增生等病理表现,且病变随着周数延长而加重;加味六味地黄汤和骨化三醇组大鼠肾组织病变较模型组均有不同程度改善。（2）骨组织病理:正常组和单纯高磷组大鼠骨组织未见明显异常;模型组大鼠可见骨小梁宽度增加,平均类骨质面积增加,成骨细胞量减少,随着时间的延长,病理改变越明显;经加味六味地黄汤及骨化三醇干预后较模型组均有所改善。半定量计分结果显示,与单纯高磷组相比较,模型组各相同时间点半定量计分都增高,差异有统计学意义（P＜0.01）;与模型组相比,加味六味地黄汤及骨化三醇组各相同时间点都有所下降,有统计学差异（P＜0.05）。2.肾功能及骨矿物质代谢标志物检测结果:正常组及单纯高磷组Scr、Bun、血钙、血磷、BALP、i PTH、RANKL、1,25（0H）2D3以及Osteocalcin水平未见明显异常,两组间各相同时间点差异无统计学意义（P＞0.05）;模型组Scr、Bun、血磷、BALP、i PTH、RANKL以及Osteocalcin水平升高显著,血钙、1,25（0H）2D3水平降低明显,各相同时间点较单纯高磷组比较,差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）;与模型组比较,加味六味地黄汤与骨化三醇组各相同时间点Scr、Bun、血磷、BALP、i PTH、RANKL以及Osteocalcin水平降低,血钙、1,25（0H）2D3水平升高,差异有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）,而两组间差异无统计学意义（P＞0.05）。3.股骨骨密度检测结果:正常组和单纯高磷组骨密度检测未见明显异常,各相同时间点差异无统计学意义（P＞0.05）;模型组大鼠骨密度明显降低,各相同时间点较单纯高磷组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;加味六味地黄汤及骨化三醇组大鼠骨密度较模型组有所升高,各相同时间点比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;而两组间比较无统计学差异（P＞0.05）。4.肾骨组织Western blot和免疫组织化学法结果:正常组和单纯高磷组FGF23、Klotho蛋白表达未见明显差异,无统计学意义（P＞0.05）;模型组FGF23蛋白表达显著上调,可见明显棕褐色物质堆积,Klotho蛋白表达显著下调,随着时间的推移与正常组差异越显著,各时间点差异有计学意义（P＜0.01）;中药组及骨化三醇组FGF23蛋白表达下降,棕褐色物质显著减少,Klotho蛋白表达增加,与模型组比较,各相同时间点差异有统计学意义（P＜0.01）或（P＜0.05）,而两组间FGF23、Klotho蛋白表达情况无统计学差异（P＞0.05）。结论:1.加味六味地黄汤能够减轻肾性骨病大鼠肾骨组织病理损害,改善大鼠的体质及精神状态;2.加味六味地黄汤能够降低Scr、Bun水平,升高血钙,控制血磷、i PTH、BALP等,提示加味六味地黄汤能够改善肾功能,调节骨矿物质代谢平衡紊乱;3.加味六味地黄汤能够抑制FGF23的合成,上调Klotho的表达,提示其改善肾功能,调节骨矿物质代谢平衡紊乱可能与综合调控肾骨组织FGF23和Klotho的动态平衡有关。