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研究背景:世界范围内大量研究资料说明,中风是危害人类生命与健康的最高发疾病之一。其中缺血性脑中风占60-80%。而在中风后损伤级联反应中,脑缺血后再灌注损伤是其主要原因。因此早期溶栓、抗凝治疗为有效治疗方法。由于存在严格的时间窗限制,对于中风的长期恢复效果并不显著。因此有效地把握干预治疗时间成为临床治疗的关键所在。在中国,运用针刺方法治疗缺血性脑中风,具有广泛的应用基础和经过循证医学确认的证据,针刺是一种在急性期、恢复期、后遗症及康复期均有显著效果的治疗手段。所以,研究针刺治疗缺血性中风的作用机制和关键环节,就成为针灸研究的重要领域之一。研究目的:本课题通过观察针刺干预脑缺血再灌注模型大鼠后,外周血中应激-损伤-修复信号链中关键信号的动态变化,从信号传导链、病程发展过程、机体功能整体调控角度,探讨针刺治疗脑缺血再灌注后炎症损伤的机制,阐明针灸对损伤-应激与损伤-修复相关疾病过程的作用机制,将为临床治疗方案提供确切的实验室依据。研究方法:1、将大鼠按随机数字表分成空白组、模型对照组,对造模后动物进行神经功能评分,采用TTC染色观察大脑梗死情况,HE染色观察脑组织形态学变化。将清洁级SD大鼠按随机数字表分成空白组(n=10)、造模组(成模后180只)。造模成功(根据神经功能评分)的大鼠根据随机数字表分为模型对照组、针刺1组(百会透刺印堂配伍水沟穴)、针刺2组(百会配足三里穴);各组按干预时间段组又分为12h、24h、48h、72h、96h、144h6个时程(n=10)。各阶段干预结束后,取外周血清,采用ELISA法检测炎性反应相关应激信号-ACTH,内源性危险信号-Hsp70,启动和调节信号-IL-6,IL-1β,损伤效应信号-TNFα的表达。研究结果:1、模型评价:TTC染色发现缺血局部脑组织呈现白色典型染色缺失,病变区域呈现白色,分布与大脑中动脉支配区域相符。HE染色:梗死中心区染色变浅,细胞数目减少,形态不规则,细胞核固缩,核仁变小;内皮细胞肿胀;间质水肿;可以见到大量网格状空泡。2、针刺不同穴组对血清中炎性反应相关信号的影响:脑缺血再灌注模型大鼠血清中炎性反应相关信号:ACTH, IL-1β, IL-6, TNFα,Hsp70,在损伤发展过程中均呈现典型双峰曲线模式,变化趋势相似。ACTH在12h到达第一峰峰值,在48h达第二峰峰值;IL-1β, IL-6, TNFα, Hsp70均在24h到达第一峰峰值,在72-96h达第二峰峰值。电针治疗后,两个针刺组均显示:外周血清中炎性反应信号ACTH, IL-1β, IL-6,TNF α,Hsp70的第一峰表达水平显著下调;ACTH, IL-1β, TNFα的第二峰表达水平显著下调;IL-6的第二峰表达水平上调。百会穴配伍足三里穴电针治疗,对比百会透刺印堂配伍水沟穴,能够显著下调模型大鼠外周血清中炎性反应相关信号IL-6, TNFα的表达水平和第一峰、第二峰的峰值;可提前表达IL-6第二峰。研究结论:1、血管内栓阻断线法脑缺血再灌注大鼠模型,造成大脑中动脉供血区域的梗塞并产生功能障碍,且具有一定的稳定性;神经功能评分和HE染色结果提示模型复制成功。2、电针百会透刺印堂配伍水沟穴和百会配伍足三里穴均对机体应激-损伤-修复信号链发挥网络调节作用,整体影响了外周血清中内源性危险信号、启动和调节信号、损伤效应信号的表达;电针可能通过抑制机体过度应激、减轻炎性损伤过程、提前启动修复功能发挥其对缺血性脑中风的治疗作用。3、百会配伍足三里穴对比百会透刺印堂配伍水沟穴,能够更好调节机体对炎症应激、损伤的反应,减轻炎性反应及炎症损伤,更早启动修复功能;提示头穴与体穴联合应用效应优于单纯头部取穴。