【摘 要】
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脂肪组织是一个与机体能量调控相关的内分泌器官,脂肪组织所分泌的脂肪因子与机体中许多代谢进程的调控密切相关,而脂肪因子作为大分子物质它的运输需要借助于囊泡运输体系。
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脂肪组织是一个与机体能量调控相关的内分泌器官,脂肪组织所分泌的脂肪因子与机体中许多代谢进程的调控密切相关,而脂肪因子作为大分子物质它的运输需要借助于囊泡运输体系。 甲羟戊酸途径的中间产物异戊二烯化基团可用于参与囊泡运输的小G蛋白的翻译后修饰。这些小G蛋白与细胞内大分子物质的囊泡运输密切相关,并且这些异戊二烯化基团对于体内的细胞生长/分化,基因的表达以及蛋白的糖基化十分重要。GGPPS(Geranylgeranyl bisphosphate synthase)是甲羟戊酸途径中调控异戊二烯化的关键酶,它调控异戊二烯化基团的产生从而与参与囊泡运输的小G蛋白的翻译后修饰密切相关,而脂肪组织所分泌的脂肪因子的运输主要依赖于机体中的囊泡运输体系。此外,GGPP是机体中辅酶Q合成的原料,而辅酶Q是机体电子传递链中的重要组成部分,与机体的能量代谢密切相关。 利用loxp/Cre重组酶系统,选择基因组同时具有Loxp位点和GGPPS基因的Ggpps-floxed小鼠和带有脂肪细胞特异性启动子aP2的Cre小鼠aP2-Cre进行杂交以获得脂肪组织GGPPS特异性缺失的小鼠GGPPS-/-。通过DNA电泳确定该小鼠的基因组中同时具有Loxp位点和Cre基因。通过多组织的RT-PCR以及Western blot确认得到的小鼠模型其脂肪组织GGPPS缺失而其他组织GGPPS表达正常。构建脂肪组织GGPPS特异性缺失的小鼠模型为研究GGPPS与脂肪细胞生物信号调控的关系奠定了基础。将5周龄GGPPS+/+的小鼠和GGPPS-/-的小鼠分别喂以繁殖饲料和高脂饲料12周,发现脂肪组织GGPPS缺失后小鼠的体重增加,皮下脂肪组织,附睾脂肪组织以及肝脏的重量增加。并且GGPPS在脂肪组织的缺失会造成系统的胰岛素敏感性和葡萄糖耐受性降低。在高脂饮食喂养条件下与GGPPS+/+的小鼠相比,GGPPS-/-的小鼠的能量代谢显著降低。之后对小鼠的炎性状态进行考察,结果显示脂肪组织GGPPS特异性缺失的小鼠其脂肪组织中炎性细胞浸润增强,血清中炎性因子的表达量显著升高。Glut4和leptin以及adiponectin都是脂肪细胞中需要囊泡运输体系进行运输的大分子物质,GGPPS缺失后leptin分泌量下降,Glut4转位减弱,这些为GGPPS与囊泡运输的密切联系提供了有利的依据。
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