论文部分内容阅读
目的观察研究舒芬太尼延迟-早期联合预处理对缺血再灌注心肌的血流动力学、心肌肌钙蛋白-I（cTnI）水平、心肌Caspase-3活性、心肌梗死面积及心肌超微结构的影响，并探讨其对缺血再灌注损伤心肌的保护作用及可能机制，为临床治疗心肌缺血再灌注损伤提供参考。方法选健康雄性Wistar大鼠80只随机分为5组（n=16/组），假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、舒芬太尼延迟预处理组（SF1组）、舒芬太尼早期预处理组（SF2组）和舒芬太尼延迟-早期预处理组（SF1+SF2组）。除S组外，各组大鼠均通过结扎冠状动脉左前降支（LAD）的方法建立缺血再灌注模型，缺血40min，再灌注120min。S组在冠状动脉左前降支（LAD）下穿线但不结扎，旷置160min。缺血前24小时，I/R组、SF2组腹腔注射生理盐水1ml，SF1组、SF1+SF2组腹腔注射含舒芬太尼5μg/kg的生理盐水1ml。缺血前15min，I/R组、SF1组静脉缓慢输注生理盐水1ml，SF2组、SF1+SF2组静脉缓慢输注含舒芬太尼5μg/kg的生理盐水1ml。监测并记录缺血前即刻（T0，基础值）、缺血末（T1）、再灌注30min（T2）、60min（T3）、120min（T4）的心率（HR）、平均动脉压（MAP），计算HR和MAP的乘积（RPP）。每组随机取8只在T0、T1、T4时点抽取动脉血用酶联免疫吸附法检测cTnI，随后用伊文氏蓝和三苯基氯化四氮唑双染色法检测心肌梗死面积（IS）；另外8只在再灌注末取心肌组织标本，用于免疫组化法检测Caspase-3的表达水平、原位末端标记法测心肌凋亡指数及超微结构的观察。结果1.血流动力学：各组间HR、MAP、RPP的基础值差异无统计学意义（P>0.05）。缺血再灌注期间，与S组相比，I/R组、SF1组、SF2组、SF1+SF2组的HR、MAP、RPP均降低（P<0.05）；I/R组、SF1组、SF2组、SF1+SF2组组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。除S组外，与基础值相比，余各组的HR、MAP、RPP在缺血再灌注期间显著降低（P<0.01），并随再灌注时间的延长逐渐下降，以再灌注120min时最低。2.血清cTnI水平：各组缺血前即刻（T0）的血清cTnI浓度差异无统计学意义（P>0.05）。在缺血末（T1）、再灌注末（T4）两时点，与S组相比，I/R组、SF1组、SF2组、SF1+SF2组的血清cTnI水平显著增高（P<0.01）；与I/R组相比，SF1组、SF2组、SF1+SF2组的血清cTnI水平显著降低（P<0.01）；与SF1组、SF2组相比，SF1+SF2组血清cTnI水平进一步降低（P<0.05）；SF1组、SF2组组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。除S组外，与T0时相比，余各组的cTnI浓度在T1、T4两时点显著增高（P<0.01），以T4时最高。3.心肌梗死面积、Caspase-3的表达水平及凋亡指数：S组无明显心肌梗死发生、凋亡指数极低、Caspase-3表达很少。与I/R组相比，SF1组、SF2组、SF1+SF2组心肌梗死面积显著缩小、Caspase-3表达水平及凋亡指数显著下降（P<0.01）。与SF1组、SF2组相比，SF1+SF2组心肌梗死面积进一步缩小、Caspase-3表达水平及凋亡指数进一步降低（P<0.01）。SF1组、SF2组组间比较差异无统计学意义（P>0.05）。4.心肌超微结构：S组心肌细胞结构基本正常，心肌纤维排列整齐，线粒体形态正常；I/R组心肌细胞水肿，心肌纤维排列紊乱、模糊，肌丝断裂，线粒体膜肿胀、空泡化，部分嵴断裂、缺失，心肌闰盘变形、数量减少、结构模糊；SF1组、SF2组、SF1+SF2组较1/R组损伤程度明显减轻。结论舒芬太尼早期预处理、延迟预处理及延迟-早期联合预处理均可通过降低大鼠血清cTnI水平、缩小心肌梗死面积、抑制Caspase-3表达、减少心肌细胞凋亡、减轻心肌超微结构的改变对缺血再灌注损伤心肌起到保护作用，且联合预处理组效果更好。