环孢素A诱导大鼠牙龈增生中CyPA,CD147,MMP-2,MMP-9的表达及意义

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研究目的本实验通过构建CIGO动物模型,通过免疫组织化学和Western blot的方法检测增生牙龈中CyPA、EMMPRIN(CD147)、MMP-2、MMP-9的表达,旨在探讨CIGO的发病机制。研究方法1.选取48只SD雄性大鼠,按随机数字表法分为CsA实验组和对照组,依据每日测量实际体重实验组给予CsA注射液腹部皮下注射,对照组给予适量蓖麻油皮下注射;从开始给药起,每周观察大鼠牙龈增生情况。2.连续给药4周后,处死全部动物,运用影像学检查大鼠牙槽骨变化情况。3.分离磨牙牙龈,运用组织学的方法观察牙龈的变化。4.运用免疫组化的方法,检测CyPA、CD147、MMP-2、MMP-9在CsA实验组和对照组中的表达和定位。5.运用Western blot的方法,检测CyPA、CD147、MMP-2、MMP-9四种蛋白在CsA实验组和对照组的表达量。结果1.大体观察结果:CsA实验组大鼠在连续注射CsA2周后,牙龈组织开始出现增生;经过CsA注射液的持续注射,4周后大鼠牙龈增生明显,牙龈外形如球状、结节状,隆起于牙齿表面,相邻牙龈乳头向牙冠方向增生明显,龈沟加深,形成假性牙周袋,牙龈组织失去正常形态,牙周探诊未见出血,无牙周附着丧失;对照组牙龈未见增生。建模成功。2. Micro CT检查结果:实验组与对照组大鼠均无牙槽骨丧失,牙槽骨高度无变化。3. Western blot结果:CsA实验组中CyPA、MMP-2、MMP-9蛋白表达与对照组相比明显降低,但CD147蛋白表达在两组间无明显差异。4.免疫组化结果:与对照组相比,CsA实验组中CyPA、MMP-2和MMP-9免疫组化阳性表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);而CD147的阳性表达在两组间无明显变化,差异不具有统计学意义(P>0.05)。结论CsA可能通过下调CyPA的表达,影响了CyPA与CD147的相互作用,使CyPA-CD147复合物介导的MMPs信号通路受到影响,下调了MMPs的表达,抑制了胶原的降解,引起胶原生成的相对增多,形成药物性牙龈增生。
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