食欲素A对绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮影响的研究

来源 :内蒙古农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:gengyuefeng009
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食欲素是一种调节人体食欲、由下丘脑合成分泌的一种信号分子。它能直接调节动物生殖内分泌的活动。研究发现,哺乳动物的生产性能与其卵巢内颗粒细胞分泌的血浆孕酮的含量关系密切。动物生殖系统的功能受黄体生长发育及相关激素的影响。因此,研究哺乳动物孕酮的分泌调节对哺乳动物生产性能的启动和维持具有重要意义。本试验为了研究食欲素A对绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮及其对相关蛋白的影响,在体外培养绵羊卵巢颗粒细胞,经鉴定后黄体化处理,分别作用Oh、24h、48h、72h,采用ELISA技术检测绵羊卵巢颗粒细胞分泌孕酮情况以选取最适黄体化时间,添加不同浓度(1nM、10nM、58nM、100nM、145nM)的食欲素A分别处理0h、24h、48h、72h。运用ELISA技术检测绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮,进一步运用Western Blot技术检测绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮过程中的关键蛋白STAR、3 β-HSD和P450(CYP11)的表达量变化情况。结果表明:1.ELISA检测绵羊卵巢颗粒细胞黄体化处理24h孕酮分泌量最高。2.添加不同浓度食欲素A分别处理不同时间的绵羊卵巢黄体化颗粒细胞,采用ELISA技术检测分泌孕酮分泌量呈逐渐升高然后下降的趋势,且浓度在10nM表达量最高;添加同一浓度的食欲素分别作用不同时间,绵羊卵巢黄体化颗粒细胞分泌孕酮分泌量呈逐渐升高然后下降的趋势,且时间在24h表达量达到最高。3.Western Blot技术检测绵羊卵巢黄体化颗粒细胞中同一时间不同浓度的STAR、3 β-HSD和P450(CYP11)的表达量呈逐渐升高然后下降的趋势,且浓度在10nM时表达量最高;添加同一浓度食欲素A分别作用不同时间的STAR及3 β-HSD的表达量呈逐渐升高然后下降的趋势,且处于24h时表达量最高,但P450(CYP11)的浓度随时间的增加而降低。
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