【摘 要】
:
杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)是一种常见的鱼类病原菌,它能感染包括罗非鱼(Oreochromis niloticus)在内的多种养殖鱼类,给我国水产养殖业造成了巨大的经济损失。通用应激蛋白(Universal stress proteins,Usps)是一系列由应激反应诱导产生的蛋白,普遍存在于细菌和其他生物体中。越来越多的证据表明,Usps在细菌适应各种环境胁迫方
论文部分内容阅读
杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)是一种常见的鱼类病原菌,它能感染包括罗非鱼(Oreochromis niloticus)在内的多种养殖鱼类,给我国水产养殖业造成了巨大的经济损失。通用应激蛋白(Universal stress proteins,Usps)是一系列由应激反应诱导产生的蛋白,普遍存在于细菌和其他生物体中。越来越多的证据表明,Usps在细菌适应各种环境胁迫方面发挥着重要作用,它们有助于病原菌适应宿主环境,并参与细菌致病性。然而,Usps在杀鱼爱德华氏菌中的作用尚不清楚。本论文围绕杀鱼爱德华氏菌通用应激蛋白展开研究,探究其在细菌抗逆性和致病性等方面的作用。首先我们利用生物信息学方法分析了杀鱼爱德华氏菌基因组,鉴定了13个Usps。通过与大肠杆菌(Escherichia coli)6个Usps比对并构建系统进化树,发现这13个Usps蛋白归为四个簇。随后,我们检测了这13个usp基因在应激条件下的表达,RT-q PCR结果显示,与正常条件下的表达相比,在高温条件下,usp1、usp4和usp13的表达显著上调,其中usp13上调倍数高达31.9倍;在过氧化氢应激条件下,usp1、usp4、usp10和usp13表达显著上升,其中上调倍数最高的仍是usp13(30.8倍);在酸性条件下,有近一半的usp基因表现为显著上调,其中上调倍数最高是usp5(18.5倍),其次是usp13(16.2倍);在宿主血清应激条件下,绝大多数usp基因表达上调,其中usp5的表达倍数最高(32.3倍),在其它三种条件下都高表达的usp13,在血清应激时却没有显著性变化。综合这些结果,我们推测Usp13是杀鱼爱德华氏菌重要的抗胁迫蛋白。为研究usp13的生物学作用,我们构建了usp13基因框内缺失突变株TX01Δusp13。与野生株TX01相比,缺失突变株TX01Δusp13在正常条件下的生长没有受到影响,但对高温、过氧化氢和低p H的耐受性明显降低;usp13缺失显著减弱了细菌生物膜的形成能力,降低了细菌对血清杀灭的抵抗力,同时还导致细菌的运动能力显著下降;这些结果不仅证实了usp13是一个重要的抗胁迫因子,还表明其很可能参与了细菌的致病作用。为了进一步明确usp13在杀鱼爱德华氏菌中的致病作用,我们对敲除株TX01Δusp13进行了一系列检测,发现相较于野生株TX01与回补株TX01Δusp13C,敲除株的毒力与致病性明显减弱,包括细菌黏附宿主细胞的能力,细菌在宿主细胞内生存和繁殖的能力以及侵染宿主组织的能力,同时证明了该回补株的毒力显著恢复,与野生株相近。这进一步证实了usp13在细菌致病性中具有重要作用。为了进一步探究野生株TX0与敲除株TX01Δusp13对宿主的影响,我们对TX01和TX01Δusp13诱导的宿主免疫反应进行了分析,结果表明,经过TX01Δusp13感染的罗非鱼巨噬细胞中的活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)水平显著高于TX01。此外,在TX01Δusp13感染的鱼体内的多种细胞免疫相关因子(IL-6,IL-8,IL-10,TNF-α和CC2)表达水平显著高于TX01。这些结果表明,usp13的缺失减弱了克服宿主对病原体感染的免疫应答能力。综上所述,我们的研究表明,Usp13不仅是杀鱼爱德华氏菌抗逆性的重要参与者,而且对杀鱼爱德华氏菌的致病性起着重要作用,并有助于阻断宿主对病原菌感染的免疫应答。
其他文献
随着社会的发展,人们对能源的需求量越来越大,而地球有限的常规能源储量使得人们面临日趋严峻的能源危机。建筑能耗占全球终端能耗总量的比例已达35%,是最大的终端用能部门。
我国煤炭资源丰富,目前80%的火力电厂使用煤做燃料,煤炭依旧是电力生产中的主导能源,随着当今社会科学技术的发展,尤其是互联网科技的不断发展,大量电子设备、家用商用医用电器、纯电动汽车高铁等交通工具都需要电能的支撑才能够正常运转,社会、人民对电力需求持续增长,电成为人们不可或缺的必需品。面对我国电力不断推行市场化运营,同时面对中国五大发电集团的产业竞争,公司必须更加重视人才培养、员工培训,不断创新培
碳化硅是一种典型的共价键结合的化合物材料,具有优异的机械强度、良好的热稳定性与导热性以及较高的熔点。这些优点使得碳化硅成为一种适用于高温环境中电子设备的很有前途
随着医疗水平不断提升,患者不仅对医疗手段、医疗仪器地要求越来越高,而且对就医质量的服务要求也相应有所提高。现在社会医疗的焦点集中于患者对医院就医体验中,就医流程是否通畅,就诊方式是否便捷,就诊效率是否高效都会影响患者满意度就医。由于医院的营运管理模式粗放,患者满意度降低是普遍现象,通过管理理论对医院各方面进行优化改革至关重要。首先,本文基于对设施布置理论的研究,收集天津ZL医院门诊各层楼的布局图,
研究背景精神行为症状(Neuropsychiatric Symptoms,NPS)被认为是影响轻度认知障碍(Mild Cognitive Impairment,MCI)疾病进程发展的独立危险因素。NPS如果不及时治疗,会加速MCI向痴呆的发展,增加住院时间,严重损害患者生活质量,增加医疗及照顾者负担,因此,对MCI人群的NPS进行早期干预非常重要。怀旧疗法是痴呆研究中常用的心理社会干预手段,其符合
随着城市不断繁荣,城市结构越紧凑,地面上的交通拥堵严重。为解决大、中运量的交通系统单一且造价昂贵的问题,越来越多的城市对悬挂式单轨交通系统有所青睐。本文设计了一种由轮边电机独立驱动的悬挂式单轨转向架。该转向架不需要复杂的传动系统,传动效率高,质量轻,结构简单。本文首先根据国内外现有的悬挂式单轨转向架的技术参数确定了转向架的总体参数,由三维建模软件Cero4.0对其进行建模,并分析了该转向架的结构特
随着科技的发展和环境、能源问题的日益严重,在环保和节能方面具有很大优势的新能源汽车逐渐进入了人们的视野,成为了当今最有发展前景的产业。动力电池作为电动汽车的主要动
在高压等级的电网建设中,气体绝缘变电站(GIS)以SF6气体作为绝缘介质,在电力系统中得到了广泛的应用。GIS中的隔离开关在分、合闸操作过程中,形成波头时间短,振荡频率高的特
背景:CAD(Coronary Artery Disease,冠状动脉疾病)是导致全球人群发病率和死亡率升高的主要原因,疾病的诊断和治疗给全球带来了巨大的经济压力。许多炎症因子在遗传水平上影响着动脉粥样硬化和冠心病的发生发展。已有文献报道可溶性IL-1R1/CD121a(Interleukin 1 Receptor Type I,白细胞介素1受体I型)的表达量增加与CAD(Coronary Art
小微企业是我国经济社会中重要的细胞经济组织,它在数量上的优势为我国庞大的人口基数解决就业问题奠定了扎实的基础。但是由于小微企业自身发展先天不足,加上外部不利融资环境的影响,使得信息不对称成为横亘在小微企业和金融机构间的一大障碍,进而造成了小微企业持续在融资难、融资贵的困境中徘徊的局面。近一段时间来,受我国经济发展阶段和外部贸易环境恶化的影响,我国金融市场对内改革的步伐加快,对外开放的口子变大,这使