海参有强烈的自溶能力,给养殖和加工带来不便。自溶发生时,海参化学组成发生变化。体腔液通过体壁上的孔隙在海参体内循环,其中的蛋白酶可能在自溶中产生作用。因此,本文对海参体腔液中蛋白酶的性质和及其在自溶中的作用进行了研究,为海参贮藏和加工所用。从刺参(Stichopus japonicus)获得体腔液,对离心所得的上清液的酶学性质进行研究。以偶氮酪蛋白为底物,考察了体腔液中蛋白酶的最适反应pH和温度,研究了金属离子(Ca2+ Mg2+ Cu2+ Mn2+,Zn2+)和特异性抑制剂(EDTA、PMSF、ABESF、TPCK 和TLCK)对酶活力的影响。实验结果显示,体腔液蛋白酶在pH3.5、pH7.5、pH9.0、pH10.0、pHll.5呈现酶活力峰。体腔液蛋白酶的最适温度均在40℃到50℃范围内。蛋白酶抑制剂中EDTA的抑制作用最明显,其余依次为PMSF。本文采用酶谱法对体腔液进一步研究,体腔液在酪蛋白酶谱图上呈现两条活性蛋白带,在明胶酶谱图上呈现出6条以上的蛋白酶带。明胶酶谱结果显示,抑制剂对体腔液蛋白酶的明胶降解活性有明显抑制作用,抑制从强弱顺序为EDTA>PMSF>TPCK>TLCK,表明体腔液中的蛋白酶主要是金属蛋白酶和丝氨酸蛋白酶。本文进一步考察了体腔液蛋白酶对海参体壁组织(外皮层、中间层和内皮层)的降解作用。采用Lowry法和SDS-PAGE分别检测TCA可溶性寡肽含量及蛋白组成变化。结果显示,海参体壁组织与体腔液于45℃共同孵育3h后,组织蛋白发生明显降解,同时TCA可溶性寡肽含量增加,提示体腔液中蛋白酶在海参自溶中发挥了促进作用。