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背景与目的：肺癌是恶性肿瘤常见的死亡原因，在所有肺癌中非小细胞肺癌占到总数的75%~80%。迄今为止，手术仍是治疗非小细胞肺癌最有效的方法，但大约65%的患者在诊断时，肺癌已进展至晚期。对于大多数非小细胞肺癌患者，特别是Ⅰ期和Ⅱ期的患者来说，其症状并不明显，因此很难做出早期诊断。目前，组织细胞学检查仍是诊断非小细胞肺癌的金标准，但是要取得组织或细胞，往往需要一种侵入性的检查方式。而现有的肺癌相关标志物对诊断肺癌的敏感度较低，此外影像学检查对诊断肺癌，特别是Ⅰ期和Ⅱ期的肺癌存在较高的假阳性率。因此，需要一种非侵入性的、敏感度和特异度较高的生物标志物来用于对早期非小细胞肺癌的诊断，从达到早期发现、早期诊断、早期治疗，进而降低非小细胞肺癌的死亡率。最近研究发现血浆中存在大量microRNAs，本研究旨在探讨血浆microRNAs对早期（Ⅰ期、Ⅱ期）非小细胞肺癌的诊断价值。方法：本研究以149例Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌患者和83例正常人为研究对象。首先根据相关文献报道，筛选出10种可能具有诊断价值的microRNAs，即miR-30d、 miR-383、miR-20a、miR-145、miR-221、miR-25、miR-223、miR-21、miR-126、miR-210。随后使用实时荧光定量RT-PCR检测这10种microRNAs在20例Ⅰ期、Ⅱ期非小细胞肺癌患者和20例性别、年龄相匹配的正常人血浆中的表达水平。筛选出上调表达且表达差异>2倍的microRNAs，然后在129例非小细胞肺癌患者和83例正常人中进行验证。最后使用受试者工作特征曲线，分析其对Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌的诊断价值。此外，为了观察血浆中异常表达的microRNAs是否与肿瘤组织有关，我们检测了20例接受手术治疗的Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌患者术前及术后血浆中microRNAs的表达水平。结果：上述10种microRNAs经过在20例Ⅰ期、Ⅱ期非小细胞肺癌患者和20例正常人中的筛选，我们发现miR-145、miR-20a、miR-21和miR-223在NSCLC患者血浆中的表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）,分别上调表达21.67+0.89、13.39+1.02、6.15+0.49和2.64+0.39倍。而miRNA-383在血浆中未检测到表达（平均Ct值>35）。miR-221、miR-25和miR-30d在非小细胞肺癌组和对照组中，表达水平不具有显著统计学差异（P>0.05）。miR-126、miR-210为下调表达且表达水平不具有显著统计学差异（P>0.05）。随后在129例非小细胞肺癌患者和83例正常人中进行的验证实验，也表明上述4种microRNAs在Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌患者血浆中的表达水平显著高于正常对照组（P<0.05）。此外受试者工作特征曲线分析显示，miR-145对早期非小细胞肺癌诊断的敏感度和特异度最高，达到80.6%和89.2%，受试者工作特征曲线下面积为0.886（95%CI：0.835-0.925）。上述4种microRNAs联合起来，可提高对Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌诊断的敏感度和特异度，达到81.8%和90.1%，受试者工作特征曲线下面积为0.897（95%CI：0.875-0.917）。这4种microRNAs在Ⅰ期和Ⅱ期非小细胞肺癌患者术后血浆中的表达水平与术前相比，均有显著下降（P<0.05）。结论：血浆miR-145、miR-20a、miR-21和miR-223可作为诊断早期NSCLC的潜在标志物，其在血浆中的异常表达来源于肿瘤组织；miR-16可作为血浆microRNA检测的内参基因；实时荧光定量RT-PCR是检测血浆microRNA表达水平的可靠技术方法。